脐血间充质干细胞经转染绿色荧光蛋白后治疗SCID小鼠烫伤的创面效应示踪

发布时间：2024-03-06 01:38

　　目的利用该实验室先期已建成的人脐血源间充质干细胞株(FUCB-MSCs),标记上增强型绿色荧光蛋白(EGFP),以对烫伤SCID小鼠行外源性FUCB-MSCs移植治疗的创面区进行移植效应示踪。方法FUCB-MSCs经腺病毒转染标记GFP;建立深Ⅱ度烫伤SCID小鼠模型,将小鼠随机分为低剂量移植组、高剂量移植组和空白对照组,每组6只,每只2个创面,共12个创面,分别将转染后的GFP-MSCs按照0.2mL 1×106个、0.2mL 2×106个以及等体积培养基通过尾静脉注射的方式进行创面移植。移植9d后取各组创面组织行冰冻切片HE染色,比较各组创面面积和创面细胞数,荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白表达和创面修复损伤情况。结果 FUCB-MSCs经逆转录病毒感染后,48h荧光显微镜下可见到EGFP表达,阳性率在80%以上,且6周后仍能观察到GFP稳定表达,移植后创面部位可观察到人源性GFP阳性表达,移植3周后荧光未见衰减;移植标记了GFP的FUCB-MSCs后SCID小鼠未出现排斥反应,低剂量组、高剂量组与对照组比较,在创面面积和细胞数上差异均有统计学意义(P<0.05),可提示尾静脉移...

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【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 主要材料和试剂
    1.2 实验方法
        1.2.1 FUCB-MSCs的复苏培养与扩增
        1.2.2 EGFP标记FUCB-MSCs
        1.2.3 SCID小鼠烫伤模型建立
        1.2.4 移植创面分组情况
        1.2.5 标记细胞观察
        1.2.6 组织学观察
        1.2.7 统计学方法
2 结果
    2.1 FUCB-MSCs的复苏与培养
    2.2 FUCB-MSCs体外标记EGFP
    2.3 烫伤愈合恢复情况及创面细胞数对比
    2.4 荧光与免疫组化结果
3 讨论
4 结论



本文编号：3920354