探讨乙肝抗病毒治疗对慢性乙型肝炎患者淋巴细胞增殖功能和特异性T细胞免疫反应的影响毕业设计论文模板

  本文关键词：抗病毒治疗对慢性乙型肝炎患者淋巴细胞增殖功能和特异性T细胞免疫反应的影响，由笔耕文化传播整理发布。

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摘要：目的：（1）检测未抗病毒治疗慢性乙型肝炎（CHB）患者的非特异性T细胞增殖功能和HBV抗原特异性T细胞反应，评估其T细胞免疫功能；（2）检测经抗病毒治疗CHB患者的非特异性T细胞增殖功能和HBV抗原特异性T细胞反应，浅析抗病毒治疗对患者非特异性和特异性T细胞免疫功能的影响；（3）浅析CHB患者的非特异性T细胞增殖功能和HBV抗原特异性T细胞功能与肝功和病毒学指标的相关性，探讨T细胞功能与病毒血症动力学之间的联系。策略：（1）收集2012年1月至2012年5月就诊于北京佑安医院的CHB患者37例（未经抗病毒治疗者17例，即未治疗组；经抗病毒治疗者20例，即治疗组）和成功接种乙肝疫苗的健康人为对照组10例，分离其PBMC用以浅析CHB患者非特异性T细胞增殖功能和抗病毒治疗对这一功能的影响。（2）收集2012年6月至2012年12月就诊于北京佑安医院的HBV感染者83例，分离其PBMC，检测HBV特异性T细胞反应，浅析抗病毒治疗对这一功能的影响。83例HBV感染者中，未经抗病毒治疗CHB患者23例（未治疗组），抗病毒治疗CHB患者47例（治疗组），以及急性乙型肝炎患者15例（急乙组）。（3）以anti-CD3/28为刺激物，采取CFSE染色标记技术和流式细胞术检测CHB患者非特异性T淋巴细胞增殖功能；以HBV抗原（Spool、Cpool）为刺激物，采取IFN-γ ELISPOT技术检测CHB患者特异性T淋巴细胞反应。（4）比较治疗组和未治疗组CHB患者的特异和非特异性T细胞功能，浅析抗病毒治疗对CHB患者T细胞功能的影响，探讨T细胞功能与病毒血症动力学之间的联系。结果：（1）未经抗病毒治疗的CHB患者PBMC非特异性增殖能力较弱，其增殖百分比显著低于治疗组和正常对照组（t=4.229, P0.001；t=6.800,P0.001），差别有统计学作用；然而，治疗组CHB患者PBMC非特异性增殖能力显著增强，其增殖百分百接近正常对照组，差别无统计学作用（t=0.670,P=0.509）。进一步浅析显示，未治疗组CHB患者CD4+、CD8+T细胞的非特异性增殖能力低于治疗组和正常对照组，差别有统计学作用（CD4+T细胞：t=2.996, P=0.005；t=3.381, P=0.002；CD8+T细胞：t=2.962,P=0.005；t=2.863, P=0.008）；CD4CD8双阴性细胞群的非特异性增殖能力在三组间的差别无统计学作用（P0.05）。（2）CHB患者PBMC的HBV抗原（Spool、Cpool）特异性T细胞免疫反应弱、阳性率低。然而，anti-CD28可以特异性推动和放大这一历程，添加anti-CD28前后比较差别有统计学作用（Spool：t=-2.983，P=0.015；Cpool：t=-3.295，P=0.009）。（3）未治疗组CHB患者的HBV抗原特异性T细胞免疫反应阳性率低、强度弱，其针对乙肝表面抗原和核心抗原的特异性T细胞反应强度相当，，差别无统计学作用（Z=-0.483, P=0.629）；经抗病毒治疗后，CHB患者HBV抗原特异性T细胞反应显著增加，其针对乙肝表面抗原的特异性T细胞反应强于乙肝核心抗原，差别有统计学作用（Z=-2.289,P=0.022），并且乙肝表面和核心抗原特异性T细胞反应与未治疗组相比差别也有统计学作用（Spool: Z=-3.371, P=0.001；Cpool: Z=-2.510,P=0.012）；（4）CD4+、CD8+T细胞的非特异性增殖能力与血清HBV-DNA载量之间呈显著的负相关(r=－0.536，P=0.027；r=－0.594，P0.012)，CD4+T细胞非特异性增殖能力与血清HBeAg浓度也呈显著的负相关(r=－0.559，P=0.020)；并且，HBV抗原特异性T细胞免疫反应与血清HBV-DNA载量之间也呈显著的负相关(Spool：r=－0.695，P0.001；Cpool：r=－0.582，P=0.004)。另外HBV抗原特异性的T细胞反应随HBV-DNA阴转而增强，在HBV-DNA转阴1年后恢复达峰，随后随时间延长而体现出降低走势。结论：CHB患者的淋巴细胞非特异性增殖反应低下，有着B7-CD28共刺激信号通路的异常，且针对HBV表面和核心抗原的特异性T细胞免疫

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