ROS通过上调NEK7促进NLRP3炎症小体激活引起肝缺血再灌注损伤的机制研究

发布时间：2024-05-19 11:56

　　目的:1.分析小鼠肝脏缺血再灌注(Ischemia and reperfusion,I/R)动物模型中,肝脏组织内ROS和NEK7表达水平的相关性;2.观察NEK7对I/R体内模型中,NLRP3炎性小体相关蛋白表达、炎性因子分泌、肝脏功能、肝脏组织学改变和肝功能损伤程度的影响;3.探讨NEK7参与ROS对肝脏库普弗细胞(Kupffer cells,KCs)中NLRP3的调控作用以及其影响肝脏缺血再灌注损伤(Ischemia and reperfusion injury,IRI)的分子机制。方法:首先建立C57BL/6J小鼠肝I/R体内模型及RAW264.7(KCs替代细胞株)经缺氧复氧(Hypoxia and reoxygenation,H/R)处理的I/R体外模型。western-blot检测肝组织相关蛋白表达,ELISA检测血清炎性因子IL-1β和IL-18的水平,微板法检测血清AST和ALT的水平,DCFH-CA法标记流式细胞术检测肝脏组织中ROS的表达,HE染色分析肝组织损伤,TUNEL染色评估肝脏组织细胞凋亡情况,免疫荧光双标NEK7和F4/80或CK18,观察肝组织中NEK...

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【学位级别】：博士

【部分图文】：

图1-1.C57BL/6J小鼠肝IRI模型的建立A：肝脏缺血前；B：夹闭肝十二指肠韧带；C：缺血1h后

图1-1.C57BL/6J小鼠肝IRI模型的建立A：肝脏缺血前；B：夹闭肝十二指肠韧带；C：缺血1h后Figure1-1.EstablishmentofliverIRImodelinC57BL/6Jmice.:Beforehepaticis....

图1-2.小鼠血清中AST和ALT的表达Figure1-2.serumlevelofASTandALTinmice

图1-1.C57BL/6J小鼠肝IRI模型的建立A：肝脏缺血前；B：夹闭肝十二指肠韧带；C：缺血1h后Figure1-1.EstablishmentofliverIRImodelinC57BL/6Jmihepaticischemia;B:....

图1-3.小鼠血清中IL-1β和IL-18的表达Figure1-3.serumlevelofIL-1βandIL-18inmice

重庆医科大学博士研究生学位论文灌注时间对小鼠血清中炎性因子IL-1β和IL-18同再灌注时间对小鼠血浆炎性因子分泌的作用，我们3、I1R6和I1R9四组，用ELISA检测小鼠血清中IL-1，与Sham相比，I1R3组IL-1β和IL-18的表达上调，<....

图1-4.小鼠肝脏组织中NEK7、NLRP3及Caspase-1的蛋白表达A：Western-blot检测小鼠肝脏组织中NEK7、NLLRP3和Cleaved-caspase-1的蛋白表达；B：NEK7、NLLRP3和Cleaved-caspase-1的半定量分析

图1-4.小鼠肝脏组织中NEK7、NLRP3及Caspase-1的蛋白表达rn-blot检测小鼠肝脏组织中NEK7、NLLRP3和Cleaved-caspase-1的B：NEK7、NLLRP3和Cleaved-caspase-1的半定量分析gure1....

本文编号：3978048