Ⅰ类整合子介导的致病性嗜水气单胞菌的耐药性分析及R质粒的初步研究

发布时间：2024-04-21 19:19

　　嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila,AH)已成为人-畜-鱼共患病的一类重要病原菌。研究表明,该菌的耐药性已呈现快速增长趋势,而在细菌耐药性的散播中,整合子起着重要作用,这就给嗜水气单胞菌病的防治造成了很大困难。近年来,中草药和天然植物因能恢复细菌对抗生素的敏感性而逐渐成为研究的焦点。基于以上几点,本试验将针对嗜水气单胞菌的快速检测和耐药性方面进行相关研究,具体如下:1、嗜水气单胞菌气溶素和I类整合子多重PCR检测方法的建立及应用针对嗜水气单胞菌的16SrRNA、气溶素毒力因子和I类整合酶基因,本试验建立了一个三重PCR快速检测方法。通过对中华鳖、黄鳝、大鲵、鲫鱼和棘胸蛙五种来源的疑似病原菌进行检测,共分离出27株嗜水气单胞菌,其中气溶素阳性菌占70.37%(19/27),I类整合子阳性菌占44.44%(12/27)。药敏试验结果表明各分离菌均呈现出严重的多重耐药性,除8种药物的耐药率均为100%外,其余12种药物的耐药率情况相同,均为I类整合子阳性菌株的耐药率高于阴性菌株,说明整合子的存在可能导致了细菌耐药性的增加。2、I类整合子的定位本试验采用PCR扩增法和斑点杂...

【文章页数】：56 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图２－１嗜水气单胞菌生长曲线??

３．１模板的制备??３．１．１嗜水气单胞菌生长曲线的测定??以ＯＤ６００值为纵坐标，培养时间为横坐标，绘制生长曲线见图２－１。由图可见，??分离菌在６?ｈ后生长迅速，进入对数期，１４?ｈ后基本成一条直线。因此，在培养嗜水??气单胞菌时，培养１４?ｈ后便达至稳定期，不宜培养过久。?....

图２－３不同温度下ＡＨ?Ａｅｒ基因的ＰＣＲ扩增结果??

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图２－２不同温度下ＡＨ?１６ＳｒＲＮＡ的ＰＣＲ扩增结果??

Ｍ：?Ｔｒａｎｓ２Ｋ?ＤＮＡ?Ｍａｒｋｅｒ；?１：?５３．０?°Ｃ；?２：?５３．８?°Ｃ；?３：?５４．９?°Ｃ；??４：?５５．９?°Ｃ；?５：?５７．０?°Ｃ；?６：?５８．１?°Ｃ；?７：?５９．２?°Ｃ；?８：?６０．１?°Ｃ??图２－３不同温度下ＡＨ?Ａｅｒ基因的ＰＣ....

图２－４不同温度下ＡＨ?Ｉ类整合酶基因的ＰＣＲ扩增结果??

Ｍ：?Ｔｒａｎｓ２Ｋ?ＤＮＡ?Ｍａｒｋｅｒ；?１：?５３．０?°Ｃ；?２：?５３．８?°Ｃ；?３：?５４．９?°Ｃ；??４：?５５．９?°Ｃ；?５：?５７．０?°Ｃ；?６：?５８．１?°Ｃ；?７：?５９．２?°Ｃ；?８：?６０．１?°Ｃ??图２－２不同温度下ＡＨ?１６ＳｒＲＮＡ的....

本文编号：3961342