半滑舌鳎免疫相关基因C8和SHP-1的克

发布时间：2024-04-21 17:20

　　鱼类养殖在我国水产养殖业中具有举足轻重的地位,但日益频发的病害问题严重制约了鱼类养殖业的可持续发展。目前产业上迫切需要有效的病害防治技术保障水产品质量安全。对鱼类免疫机理的深入研究是实现这一目标的根本途径。半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)是我国重要的海水养殖鱼类,目前养殖产值达到10亿元之多,但是细菌性和病毒性病害对半滑舌鳎养殖业造成严重威胁,由于对半滑舌鳎抗菌和抗病毒免疫防御机理不清楚,缺乏有效病害防治措施。通过半滑舌鳎转录组数据中抗病组、染病组和健康组的Cs C8基因和CsSHP-1的表达量存在显著差异,而且鉴于此CsC8基因和CsSHP-1在半滑舌鳎免疫系统中的重要性,本研究以半滑舌鳎为研究对象,对CsC8基因和CsSHP-1基因进行克隆鉴定、重组表达及功能分析,阐明半滑舌鳎抗病分子机制,为半滑舌鳎的病害防治提供重要理论基础。具体研究结果如下:对半滑舌鳎CsC8基因进行了克隆和验证,结果发现半滑舌鳎补体Cs C8由CsC8α、CsC8β和CsC8γ3条链组成,分别由CsC8α、CsC8β和CsC8γ编码,其中CsC8α基因包含了1797 bp的开放阅读框(...

【文章页数】：85 页

【学位级别】：硕士

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摘要
ABSTRACT
引言
第一章 文献综述
    1.鱼类免疫学的发展概况
    2.鱼类免疫系统的研究进展
        2.1 免疫组织和器官
        2.2 免疫细胞
        2.3 体液免疫因子
    3.半滑舌鳎免疫系统的研究进展
    4.补体C8的研究进展
    5.SHP-1 的研究进展
    6.本研究的意义
第二章 半滑舌鳎补体基因CsC8的克隆、重组表达和免疫应答分析
    1.材料与方法
        1.1 实验材料
        1.2 半滑舌鳎组织和细胞的收集
        1.3 半滑舌鳎组织RNA提取和cDNA的制备
        1.4 半滑舌鳎CsC8基因克隆和序列分析
        1.5 半滑舌鳎CsC8基因实时定量分析
        1.6 半滑舌鳎CsC8基因的真核表达和功能验证
        1.7 重组蛋白CsC8α的功能性研究
    2.结果
        2.1 半滑舌鳎CsC8基因序列及结构域分析
        2.2 半滑舌鳎CsC8基因同源性分析
        2.3 半滑舌鳎CsC8基因在健康鱼组织中的实时定量分析
        2.4 鳗弧菌感染半滑舌鳎后CsC8基因在组织中的表达分析
        2.5 半滑舌鳎CsC8基因的真核表达
        2.6 重组蛋白CsC8α的功能性研究
    3.讨论
第三章 半滑舌鳎CsSHP-1 基因的克隆、重组表达和功能的初步分析
    1.材料与方法
        1.1 实验材料
        1.2 半滑舌鳎组织和细胞的收集
        1.3 半滑舌鳎组织RNA提取和cDNA的制备
        1.4 半滑舌鳎CsSHP-1 基因克隆和序列分析
        1.5 半滑舌鳎CsSHP-1 基因实时定量分析
        1.6 半滑舌鳎CsSHP-1 基因的真核表达
        1.7 重组CsSHP-1 体外抗肿瘤活性实验
    2.结果
        2.1 半滑舌鳎CsSHP-1 基因序列及结构域分析
        2.2 半滑舌鳎CsSHP-1 基因同源性分析
        2.3 半滑舌鳎CsSHP-1 基因在健康鱼组织中的实时定量分析
        2.4 感鳗弧菌感染半滑舌鳎后CsSHP-1 基因在组织中的表达分析
        2.5 不同病原感染半滑舌鳎淋巴细胞后CsSHP-1 的表达分析
        2.6 半滑舌鳎CsSHP-1 基因的真核表达
        2.7 半滑舌鳎重组CsSHP-1 体外抗肿瘤活性实验
    3.讨论
结论
参考文献
研究生期间的科研成果
致谢



本文编号：3961206