Notch抑制剂对内皮细胞促进造血干细胞增殖的影响

发布时间：2024-01-23 17:20

　　目的:通过体外直接接触共培养C57小鼠肺微血管内皮细胞(MEC)与GFP小鼠造血干细胞(HSC),并在共培养体系中加入Notch抑制剂DAPT,在第4天检测Notch分子的表达,研究MEC促进HSC增殖的分子机制及Notch抑制剂对肺MEC促进HSC增殖的作用,初步探讨Notch信号通路对HSC的影响,为体外扩增HSC提供新的方向和为血液系统疾病寻找潜在的治疗靶点。方法:(1)C57小鼠肺组织经过I型胶原酶消化获得MEC,通过免疫荧光及流式细胞术检测其CD31、CD34、CD45、vWF表达情况,连续8天观察P1代MEC生长情况,每天消化3孔用于细胞的计数并绘制MEC的生长曲线。(2)采取Ficoll密度梯度离心法从GFP小鼠的骨髓分离得到单个核细胞(MNCs),然后利用miniMACS磁珠分选仪分选得到CD117+细胞,利用流式细胞术检测HSC含量及HSC CD34CD117共表达率。(3)体外直接接触共培养骨髓CD117+细胞与P1代的MEC,并在培养体系中加入DAPT,分组为:HSC组、HSC+EC组、HSC+EC+DAPT组、HSC+DAPT组,每组3个复孔。培养至第4天收集造...

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【学位级别】：硕士

图1固定好的C57小鼠

图2-1原代4天（×100）

图2-2原代6天（×100）

图2-3原代8天（×100）

本文编号：3883057