连翘苷调控炎症的抑制作用及机制研究

发布时间：2024-03-04 20:43

　　目的探讨连翘苷(PHN)对脂多糖(LPS)诱导的炎症反应的抑制作用及机制。方法建立体外LPS诱导小鼠巨噬细胞(RAW264.7)炎症模型研究炎性细胞因子的分泌及相关通路蛋白的表达。实验采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测不同浓度的PHN对小鼠巨噬细胞活性的影响,采用Griess法检测细胞上清液中一氧化氮(NO)释放量,ELISA法检测白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达量,Western blot法检测TLR4信号通路相关蛋白的表达,分子对接验证结合模式。并且建立体内LPS诱导的急性肺损伤(ALI)模型,通过观察组织病理学变化,研究PHN的保护作用。结果 PHN在30μmol/L以下浓度范围对细胞增殖无明显抑制作用。并且PHN对LPS诱导的巨噬细胞细胞分泌NO、TNF-α和IL-6具有抑制作用。进一步的研究表明,PHN通过抑制TLR4信号通路抑制巨噬细胞的细胞因子分泌,并且分子对接显示PHN与TLR4蛋白直接有较好的亲和力。另外,PHN在LPS诱导的急性肺损伤模型中显示出良好的体内抗炎活性。结论 PHN可以有效地调控LPS诱导的炎症,其机制可能是阻断TLR4信号通...

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【部分图文】：

图1PHN对LPS诱导的RAW264.7细胞中NO释放的抑制率

用LPS处理RAW264.7细胞导致炎症因子的分泌,包括NO、IL-6和TNF-α。与空白对照组相比,LPS模型组细胞上清液的NO含量明显增加。PHN作用的细胞上清液中NO含量明显低于LPS模型组。其中,当浓度为10μmol/L时,PHN对NO释放的抑制率为63.34%;当浓....

图2PHN对RAW264.7细胞活力的影响

为了避免对NO释放的抑制作用与细胞活力相关,采用MTT测定法检测不同浓度PHN及塞来昔布对细胞活力的影响。如图2,PHN和阳性药物在不同浓度范围内(10、20、30μmol/L)对细胞增殖无明显抑制作用,细胞存活率均大于95%,不同剂量的PHN组间差异无统计学意义。结果表明PH....

图3PHN对RAW264.7细胞中LPS诱导的细胞因子分泌量的变化

通过肺组织切片病理形态学变化评估PHN对LPS诱导的ALI小鼠模型的保护作用。如图6所示,在正常小鼠中,肺泡结构清晰、完整,肺泡腔内无分泌物和炎性细胞浸润。LPS刺激导致显著的炎症改变,用PHN预处理LPS诱导的肺损伤炎症小鼠,则明显地改善了肺组织病变,肺泡腔炎性细胞减少,肺小叶....

图4PHN对LPS诱导RAW264.7细胞TLR4蛋白表达水平的影响

图3PHN对RAW264.7细胞中LPS诱导的细胞因子分泌量的变化图5PHN插入TLR4活性位点的结合模式图

本文编号：3919148