玻璃体腔注射卡介菌纯蛋白衍生物诱导Eales病动物模型的研究

发布时间：2021-03-12 13:35

目的：探讨卡介菌纯蛋白衍生物玻璃体腔注射建立Eales病动物模型。方法：1、分组及致敏方法：将成年雄性SD大鼠(N=75)随机分成五组。实验Ⅰ组(n=15)：用浓度为1mg/ml的HS-Agp35+等量FICA(弗式不完全佐剂)O.1ml大鼠一侧后足垫皮内注射,另一侧注射0.1mlBCG-PPD5U+FICA,14天后玻璃体腔注射BCG-PPD5U;实验Ⅱ组(n=15)：用浓度为lmg/ml的HS-Agp35+等量FICA(弗式不完全佐剂)0.2ml大鼠一侧后足垫皮内注射,14天后玻璃体腔注射BCG-PPD5U;实验Ⅲ(n=15)、Ⅳ(n=15)及V组(n=15)致敏方法同实验Ⅰ组；实验Ⅲ组14天后玻璃体腔注射HS-Agp3510Ug;实验Ⅳ组14天后玻璃体腔不打药；实验V组(对照组)14天后玻璃体腔注入0.9%NS0.1ml。2、观察指标：大鼠眼部常规检查、荧光素眼底血管造影(fluorescein fundus angiography,FFA)、视网膜铺片、HE染色病理切片、免疫组化检测视网膜VEGF、PDGF,监测血液中辅助T淋巴因子(IFN-γ,TNF-α, IL-4),并作相关性分析。结果：1、眼部常规检查：(1).实验Ⅲ组的葡萄膜炎反应明显；(2).实验Ⅰ组、实验Ⅱ组3个月后个别大鼠虹膜表面发现新生血管；(3).实验Ⅳ组、V组(对照组)未能发现阳性体征。2、FFA：(1).实验Ⅰ组、实验Ⅱ组可产生以视网膜血管病变为主的眼内炎症反应；(2).实验Ⅲ组可产生以脉络膜病变为主的眼内炎症反应；(3).实验Ⅳ组、Ⅴ组(对照组)未能发现阳性体征。3、视网膜铺片：(1).实验Ⅰ组、实验Ⅱ组可产生以视网膜血管病变为主的眼内炎症反应,但形态上无法区分两组别的血管炎程度；(2).实验Ⅲ组可产生以脉络膜病变为主的眼内炎症反应,但炎症可累及视网膜血管；(3).实验Ⅳ组、Ⅴ组(对照组)未能发现阳性体征。4、免疫组化：(1).VEGF抗体：阳性面积实验Ⅰ组实验Ⅱ组实验Ⅲ组；(2).PDGF抗体：实验Ⅰ组有阳性结果,实验Ⅱ、Ⅲ、均未得到阳性结果。5、病理切片：见视网膜增厚、皱褶、结构紊乱,视网膜血管扩张、充血,Ⅰ、Ⅱ组鼠内界膜不规整,有少量的血管内皮细胞核突破内界膜,并且内界膜下的细胞增殖,排列紊乱,Ⅰ组偶见视网膜表面或视网膜前新生血管芽,Ⅲ组可见内界膜下细胞排列稍不规则。6、血液中辅助T淋巴因子(IFN-γ,TNF-α,IL-4):(1).IFN-γ在模型鼠血清中的浓度含量和正常对照组鼠的浓度含量分别为(385.16±19.72)(200.38±15.84);TNF-α分别为(25.75±2.04)(12.14±1.16)；IL-4分别为(13.18±0.34)(11.56±0.36)；模型鼠组血清中IFN-γ, TNF-α, IL-4浓度高于正常对照组,差异有统计学意义(P0.01)。(2).Thl和Th2代表因子的比值IFN-Y/IL-4在模型鼠组和正常对照组的比值分别为(29.20±1.29)(17.35±1.35),模型组高于正常组,差异有统计学意义(P0.01)。结论：1.用单一HS-Agp35抗原、HS-Agp35抗原联合BCG-PPD大鼠足垫皮内致敏后,玻璃体腔注射BCG-PPD可产生视网膜血管炎症；且联合致敏组的视网膜血管炎的模型与人类Eales病更接近； 2.联合致敏Eales病制模过程中BCG-PPD起主导作用； 3.通过向致敏大鼠玻璃体腔注射BCG-PPD诱导的Eales病模型,T淋巴细胞亚群的失平衡可能参与了Eales病的免疫机制；

【文章来源】：遵义医科大学贵州省

【文章页数】：67 页

【学位级别】：硕士

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摘要

Abstract

前言

材料与方法

结果

1.实验第一部分

2.实验第二部分