基于全转录测序探讨Masquelet诱导膜促进成骨的机制与HIF-α通路的关系

发布时间：2024-04-25 19:17

　　目的:基于全转录测序技术,研究在PMMA骨水泥材料诱导下产生的诱导膜的成骨机与低氧诱导因子-α信号通路(HIF-α信号通路)之间的关系。方法:采用随机分组方式将18只雄性SD大鼠分为诱导膜组和对照组,每组各9只,两组均在大鼠的左侧股骨中段截取出长度为0.5cm的骨块,并以钢板固定。诱导膜组于大鼠股骨缺损处植入PMMA骨水泥块,对照组不植入骨水泥。造模后所有大鼠均单笼饲养,并于术后5天连续给与青霉素预防感染,观察并统计两组大鼠术后进食、行走、伤口愈合情况。造模6周后分别采集诱导膜组骨水泥表面附着生长的诱导膜组织和观察组骨缺损周围的骨膜组织,然后对两组标本进行HE染色观察组织病理学变化,行全转录组测序对比两组的差异基因表达,对两组样本差异表达的m RNA所在基因进行筛选,排查HIF-α信号通路的差异基因的富集程度,筛选出可能与诱导膜成骨效应相关的细胞通路,最后行免疫荧光检测验证HIF-α信号通路相关的细胞因子。结果:两组大鼠术后均正常进食、排便,伤口愈合良好,无明显感染迹象。HE染色下诱导膜组织中含大量细胞,并且形成了丰富的与骨水泥方向平行的纤维组织,微血管网丰富。对照组细胞数及微血管数量...

【文章页数】：43 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图1.已安置6周的PMMA骨水泥

中烘烤120分钟，随后取出切片，以二甲苯及乙化，以3%H2O2封闭5分钟以消除内源性过氧化物各2分钟，将切片放入柠檬酸钠缓冲液中10分钟2次各2分钟，5%BSA封闭液孵育10分钟，甩去抗小鼠HIF-1α抗体和大鼠抗小鼠VEGF抗体，湿片3....

图2.对照组与诱导膜组的HE染色对比，可见诱导膜组细胞数及微血管数量均高于对照组

况及标本外观情况18只大鼠均可正常进食及排便，术后3天内均所有大鼠伤口均愈合良好，伤口周围无红肿、诱导膜组织样本和骨膜组织样本外观均呈灰白透明薄模样组织，样本表面均无脓性分泌物。观察结果显示，诱导膜组织中含大量细胞，并且形成了丰的纤维组织，微血管网丰富。对照组细胞数及膜组....

图3.差异表达mRNA火山图，有显著性差异表达的mRNA用红色点（上调）和绿色点（下调）表示，无显著性差异表达的mRNA用蓝色点表示

图5.图a：对照组HIF-1α染色；图b：诱导膜组HIF-1α染色；图c：对照组VEGF染色；图d：诱导膜组VEGF染色

本文编号：3964135