白细胞介素22对HaCaT细胞CCL28表达的影响

发布时间：2024-03-25 21:38

　　目的探讨白细胞介素(IL-22)对HaCaT细胞黏膜相关上皮趋化因子(CCL28)表达的影响。方法培养HaCaT细胞,将其分为6组:4个IL-22组(分别用12.5、25、50、100μg/L的IL-22进行干预处理);阻断剂组(50μmol/L PD98059阻断干预,2 h后加入50μg/L IL-22);对照组(用PBS处理)。24 h后,用CCK-8检测细胞的增殖;用实时荧光定量RT-PCR检测CCL28 mRNA的水平变化;用蛋白免疫印迹法、酶联免疫吸附法和免疫荧光检测CCL28蛋白水平的变化。结果 CCK-8检测显示,上述浓度的IL-22作用于HaCaT细胞24 h后,对细胞的增殖有明显的促进作用,且这种促进作用能被PD98059抑制,差异具有统计学意义(P<0.05)。实时荧光定量RT-PCR检测显示,上述浓度的IL-22作用于HaCaT细胞,细胞中CCL28 mRNA逐渐升高,均较对照组升高,差异有统计学意义(P<0.01);通路阻断剂组较50μg/L IL-22组降低,差异有统计学意义(P<0.05)。用蛋白免疫印迹法和酶联免疫法检测到CCL28蛋白...

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【部分图文】：

图1CCK-8检测HaCaT细胞增殖

不同浓度的IL-22作用于HaCaT细胞24h后,对细胞的增殖有明显的促进作用,细胞的增长率呈现出浓度的依赖性,差异有统计学意义(F=109.94,P<0.01)。且这种促进作用能被PD98059抑制,差异具有统计学意义(F=131.02,P<0.05),见图1。2.2实时荧....

图2实时定量荧光PCR检测CCL28mRNA水平

mRNA的变化在加入不同浓度的IL-22后,HaCaT细胞CCL28mRNA的水平均较对照组升高,差异具有统计学意义(F=14.61,P<0.01)。阻断剂组中CCL28mRNA的水平较50μg/LIL-22组明显降低,且这种差异具有统计学意义(F=123.05,P....

图3蛋白印迹法检测CCL28蛋白表达

12.5、25、50、100μg/LIL-22干预处理后,HaCaT细胞中CCL28蛋白逐渐增高,依次为(CCL28与β肌动蛋白灰度比值)0.87±0.01、1.76±0.02、2.43±0.01、2.82±0.01均较对照组(0.35±0.01)升高,差异有统计学意义(F=....

图4酶联免疫吸附法检测CCL28蛋白表达

CCL28蛋白主要位于细胞质(红色荧光物质),随着IL-22浓度的升高,CCL28的表达量较对照组逐渐递增。阻断剂组中CCL28的表达量较50μg/LIL-22组明显降低,见图5。图5免疫荧光法检测CCL28的表达

本文编号：3938878