miR-152通过调控TGFα影响前列腺癌细胞的迁移和侵袭能力

发布时间：2024-03-08 19:21

　　目的：MicroRNA(miRNA)是一类广泛存在于真核生物中的具有高度保守序列的非编码RNA，长度为20-22个核苷酸。miRNA通过结合靶基因的3′-untranslatedregion (UTR)来调控靶基因的表达，在转录后水平抑制靶基因的表达或翻译。大量证据表明miRNA在肿瘤的发展，分化，凋亡及增殖过程中起关键作用。研究表明miR-152在前列腺癌等多种肿瘤组织中低表达，但其在前列腺癌中的功能尚不清楚，本课题拟进一步研究miR-152在前列腺癌发生，发展中的分子机制。 材料和方法：采用TaqMan荧光定量RT-PCR方法检测48例前列腺癌组织和15例前列腺正常组织的样本中miR-152的表达水平。Western blot检测三对前列腺癌组织和癌旁正常组织中转化生长因子-α（TGFα）的蛋白表达水平。运用流式细胞检测（周期和凋亡）、迁移实验、侵袭实验检测及Western blot分析评估miR-152和TGFα表达变化对前列腺细胞系PC-3和DU145中的影响。双荧光素酶报告基因实验确定miR-152是否通过TGFα的3’-UTR区域直接调控TGFα。 结果：与正常前列腺组织相...

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图.1载体图谱：pGL3-ControlVector13质粒转化

南京医科大学硕士学位论文20图.1载体图谱：pGL3-ControlVector13质粒转化在无菌状态下将新鲜感受态细菌在冰上融化。菌液融化后加入10μg荧光素酶报告基因质粒，用移液器轻轻吹打混匀，在冰上放置30min，后在水浴箱42°C热休克90s，之后继续放置....

图.2RT-PCR检测miR-152在前列腺癌及其正常组织中的表达情况

25图.2RT-PCR检测miR-152在前列腺癌及其正常组织中的表达情况。(A)常组织相比，miR-152在前列腺癌表达水平是下降的。(B)miR-152在不同Gscores评分前列腺癌组织中的表达情况。(C)miR-152在不同T分级前列腺织中的表达情况。....

图.3Westernblot检测TGFα的蛋白表达水平，GAPDH为内参.N和T分别

南京医科大Figure.2miR-152expressioninresectedprostatecancer(PCa)sampbyreal-timeRT-PCR.(A)LossofmiR-152expressioninPCatissuescn....

图.4RT-PCR检测在前列腺癌PC-3细胞转染miR-152mimics后miR-152的表达水平

南京医科大学硕士学位转染miR-152mimics后前列腺癌细胞株PC-3和DU145的侵袭能力明显低于染NC组。结果表明：过表达miR-152后，肿瘤细胞的迁移和侵袭能力明显减(图.5)。在图6A显示，转染miR-152mimics后前列腺癌细胞株P....

本文编号：3922277