TGF-β1对口腔癌相关成纤维细胞在二维和三维共培养条件下迁移的影响

发布时间：2024-02-26 06:34

　　目的通过二维和三维条件下的细胞共培养模型观察转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)对口腔癌相关成纤维细胞(carcinoma associated fibroblasts,CAFs)迁移的影响。方法二维培养条件下,以培养基中加入10 ng/mL TGF-β1刺激的CAFs为实验组,以未经处理的CAFs细胞为对照组,通过划痕实验、Transwell实验观察CAFs的迁移现象;通过逆转录病毒转染,培养绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)阳性的CAFs细胞,建立人舌鳞癌细胞SCC25、GFP(+) CAFs和CAFs三维细胞共培养模型,以培养基中加入10 ng/mL TGF-β1刺激下培养的三维模型为实验组,以未加的TGF-β1的三维模型为对照组,观察在三维模型的细胞迁移现象。结果在二维培养条件下验证了10 ng/mL TGF-β1可促进口腔CAFs的迁移;成功建立SCC25、GFP(+) CAFs和CAFs三维细胞共培养模型,观察到CAFs和口腔癌细胞的迁移现象,但10 ng/mL的TGF-β1对...

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【部分图文】：

图2CAFs免疫细胞化学阳性结果×40

α-SMA和FAP常作为鉴定CAFs的标志蛋白，染色阳性表达（图2），说明培养的细胞为CAFs[12]。2.2二维培养培养条件下口腔CAFs的迁移

图3两组间二维细胞培养迁移结果的比较

在实验组细胞培养基中加入TGF-β1,HE染色后，进行比较（图5a），结果示实验组平均浸润深度/三维细胞培养组织全层深度的比值约0.436，对照组约0.433，两组间肿瘤细胞平均浸润深度比差异无统计学意义（t=0.03,P=0.977，图5b）；荧光成像比较GFP(+)CAFs在....

图4三维细胞共培养模型的迁移结果观察

图3两组间二维细胞培养迁移结果的比较3讨论

图5两组间三维细胞培养迁移结果的比较

目前CAFs研究大多采用二维模型，即划痕实验和Transwell小室实验[5-6,13]。二维培养条件较难模拟体内环境，缺乏与肿瘤细胞、细胞间基质的相互作用，与体内CAFs真实生存环境有一定差异[14]。为了能更好地模拟体内环境，研究者们模拟出三维共培养模型[15-16],Hor....

本文编号：3911478