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不同培养代次对经血源子宫内膜干细胞生物学活性的影响

发布时间:2024-01-31 01:54
  该研究明确了不同培养代次经血源子宫内膜干细胞(menstrual blood derived endometrial stem cells,MenSCs)的生物学活性差异,为深入研究MenSCs生物学特性及其潜在临床应用提供理论支持。该研究使用钙黄绿素AM(Calcein-AM)染色检测体外培养至第三代(passage 3,P3)、P9和P15代MenSCs的形态;β-半乳糖苷酶染色检测不同培养代次MenSCs的衰老程度;活性氧试剂盒检测不同培养代次MenSCs中活性氧的变化;随后利用MTT、流式细胞术及细胞活死染色在接触式共培养条件下检测P3、P9和P15代MenSCs对小鼠脾淋巴细胞活性、细胞周期、死亡情况以及脾脏淋巴细胞中CD3+和CD19+淋巴细胞比例的影响。结果表明,随着培养代次的增加MenSCs细胞面积显著增大,在培养至P15代时MenSCs开始出现大量丝状伪足。衰老程度及活性氧的含量也随培养代次的增加而显著升高;随后与MenSCs接触式共培养体显著增加了小鼠脾淋巴细胞的活性,降低淋巴细胞死亡率,且随培养代次的增加,MenSCs对...

【文章页数】:9 页

【部分图文】:

图1不同体外培养代次MenSCs生物学活性差异

图1不同体外培养代次MenSCs生物学活性差异

本研究发现,体外长期传代培养对MenSCs的细胞形态具有显著影响,培养高代次的MenSCs细胞面积显著大于低代次MenSCs,而细胞面积增大与细胞衰老程度呈正相关。随后,β-半乳糖苷酶染色也进一步验证了高代次MenSCs中存在更多衰老细胞,而形态观察亦发现,P15代M....


图2MenSCs共培养促进小鼠脾淋巴细胞存活

图2MenSCs共培养促进小鼠脾淋巴细胞存活

图1不同体外培养代次MenSCs生物学活性差异图3MenSCs共培养对小鼠脾淋巴细胞增殖无明显影响,但可显著抑制细胞碎片的产生


图3MenSCs共培养对小鼠脾淋巴细胞增殖无明显影响,但可显著抑制细胞碎片的产生

图3MenSCs共培养对小鼠脾淋巴细胞增殖无明显影响,但可显著抑制细胞碎片的产生

图2MenSCs共培养促进小鼠脾淋巴细胞存活综上所述,MenSCs随体外培养时间和传代次数的增加,出现明显的生物学活性降低等特征,且对淋巴细胞的调节能力显著下降,因此为提供高质量MenSCs,应选择低代次MenSCs,建议使用P3至P6代MenSCs,保证细胞....


图4MenSCs共培养对小鼠脾脏CD3+和CD19+淋巴细胞无明显活化作用

图4MenSCs共培养对小鼠脾脏CD3+和CD19+淋巴细胞无明显活化作用

综上所述,MenSCs随体外培养时间和传代次数的增加,出现明显的生物学活性降低等特征,且对淋巴细胞的调节能力显著下降,因此为提供高质量MenSCs,应选择低代次MenSCs,建议使用P3至P6代MenSCs,保证细胞数量的同时保障细胞质量,最终确保稳定的临床治疗效....



本文编号:3890751

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