阿米洛利介导PI3K/AKT信号通路对ARDS大鼠肺损伤的影响

发布时间：2023-11-10 19:35

　　目的通过油酸诱导的ARDS大鼠模型,探讨阿米洛利对急性肺损伤的影响以及这种影响是否是通过PI3K/Akt信号通路实现的。方法将96只Wistar雄性大鼠随机分为空白对照组、DMSO组、ARDS模型组、阿米洛利干预组。建立油酸型ARDS大鼠模型,分别于注射油酸4 h、8 h和12 h时收集大鼠血清和肺泡灌洗液,称取大鼠肺组织湿重(LW)和干重(DW),计算LW/DW比值和大鼠肺水清除率(AFC);采用Elisa法检测大鼠血清和肺泡灌洗液中uPAR、TNF-α、IL-6和IL-10水平;采用HE染色方法观察大鼠肺组织病理学变化;采用免疫组化方法检测大鼠肺组织中VEGF、VCAM-1和ET-1阳性表达水平;采用RT-PCR法检测大鼠肺组织中uPAR、PI3K、Akt和GSK 3βmRNA表达水平;采用Western blot检测大鼠肺组织中uPAR、PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt和GSK 3β蛋白表达水平。结果(1)在注射油酸4 h、8 h、12 h后,与对照组比较,ARDS大鼠LW/DW明显增大,AFC值明显减小;阿米洛利干预可使LW/DW明显减小,AFC值明显增加;(2)AR...

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中文摘要
ABSTRACT
第一章 引言
    1.1 ARDS研究进展
        1.1.1 定义和流行病学
        1.1.2 病理学
        1.1.3 发病机制
        1.1.4 药物治疗现状
    1.2 PI3K/AKT信号通路与ARDS的研究进展
        1.2.1 PI3K/Akt信号通路
        1.2.2 PI3K/Akt信号通路与ARDS
    1.3 UPAR与 PI3K/AKT信号通路的研究进展
        1.3.1 uPAR
        1.3.2 阿米洛利
        1.3.3 uPAR与 PI3K/Akt信号通路
    1.4 研究目的及意义
第二章 资料与方法
    2.1 实验材料
        2.1.1 主要试剂
        2.1.2 主要仪器
    2.2 实验方法
        2.2.1 ARDS大鼠模型建立
        2.2.2 实验分组
        2.2.3 样品收集
        2.2.4 大鼠肺组织湿重/干重比测定
        2.2.5 肺泡液体清除率(AFC)的测定
        2.2.6 ELISA检测大鼠血清和肺泡灌洗液中uPAR、TNF-α、IL-6和IL-10含量
        2.2.7 HE染色观察大鼠肺组织病理学变化
        2.2.8 免疫组化检测大鼠肺组织VEGF、VCAM-1和ET-1 阳性表达水平
        2.2.9 RT-PCR法检测大鼠肺组织uPAR、PI3K、Akt和 GSK3βmRNA表达
        2.2.10 WB检测大鼠肺组织uPAR和 PI3K/Akt信号通过关键蛋白的表达
        2.2.11 统计学分析
第三章 结果
    3.1 阿米洛利对大鼠肺组织LW/DW值的影响
    3.2 阿米洛利对大鼠肺组织AFC的影响
    3.3 阿米洛利对大鼠血清和肺泡灌洗液中UPAR、TNF-Α、IL-6和IL-10 含量的影响
        3.3.1 血清
        3.3.2 肺泡灌洗液
    3.4 阿米洛利对大鼠肺组织形态学的影响
    3.5 阿米洛利对大鼠肺组织中VEGF表达的影响
    3.6 阿米洛利对大鼠肺组织中VCAM-1表达的影响
    3.7 阿米洛利对大鼠肺组织中ET-1表达的影响
    3.8 阿米洛利对大鼠肺组织中UPAR表达的影响
    3.9 阿米洛利对大鼠肺组织中PI3K/AKT信号通路因子表达的影响
第四章 讨论
第五章 结论
第六章 不足与展望
参考文献
中英文缩略词表
致谢
在学期间的研究成果
伦理批准函



本文编号：3862182