USP19在DNA双链损伤应答中的功能及机制研究

发布时间：2024-03-24 10:11

　　细胞周期的正常运行，尤其是有丝分裂期的一系列复杂而精细事件的调控，是保证基因组稳定性的关键[1]。遗传物质在复制后，经过有丝分裂期的染色体的正确分离，平均地分给子代细胞。DNA损伤普遍存在于整个细胞周期，当DNA发生损伤时，正常细胞可以激活相应的周期检查点，延缓或阻滞有丝分裂进程并启动修复，待有效地完成修复后才继续分裂[2,3]；如果检查点失去正常功能或修复机制缺陷，受损的DNA带着错误进入有丝分裂，传到子代细胞，就引入了突变，突变随着有丝分裂而累积，从而引起基因组不稳定，最终导致肿瘤的发生[4-7]。 DNA双链断裂是最严重的一种DNA损伤，相比其他DNA损伤后果更严重，如果不得到修复，细胞将面临染色体断裂和死亡，不正确的修复又可能导致肿瘤的发生[8]。细胞为了应对双链断裂，有两条修复途径：同源重组和非同源末端连接，两条途径共同维持细胞的基因组稳定[1,9-12]。DNA损伤是肿瘤治疗的常用手段，因此，DNA修复在肿瘤治疗中至关重要。DNA修复缺陷会导致细胞对DNA损伤高度敏感[13]，但当DNA修复能力异常增强，则导致肿瘤耐受DNA损伤刺激，即产生耐药[14,15]。同时，DNA修...

【文章页数】：49 页

【学位级别】：博士

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缩略词表
摘要
Abstract
前言
材料与方法
    1.材料及来源
        1.1 质粒和细胞
        1.2 主要试剂和抗体
    2. 实验方法
        2.1 质粒构建
        2.2 细胞培养
        2.3 免疫共沉淀（co-IP）
        2.4 质粒转染
        2.5 siRNA 转染
        2.6 流式细胞术分析周期
        2.7 免疫荧光染色
        2.8 Western Blot 蛋白印迹
结果
    1. siRNA 文库筛选影响细胞有丝分裂的基因
        1.1 USP19 敲低导致细胞有丝分裂指数（MI）升高
        1.2 USP19 敲低导致染色体分离错误
    2. USP19 敲低对 DNA 损伤应答及修复的影响
        2.1 USP19 受 DNA 损伤诱导表达
        2.2 USP19 在 DNA 损伤过程中被 ATM/ATR 磷酸化
        2.3 USP19 敲低影响 DNA 损伤应答通路中的蛋白磷酸化
        2.4 USP19 敲低影响 DNA 双链断裂修复
    3. USP19 与 HDAC1，HDAC2 存在相互作用
    4. USP19 与肿瘤发生发展
讨论
参考文献
结论
文献综述
    参考文献
个人简历
致谢



本文编号：3937285