IFI16协同肝细胞内干扰素诱导途径抑制HBV复制的研究

发布时间：2024-03-21 04:15

　　目的:乙型肝炎病毒感染可引起慢性乙型肝炎,极大地危害人类健康,其中固有免疫应答机制在抵抗乙肝病毒感染中起到重要作用。本课题组前期研究已经发现慢性乙肝患者肝组织和外周血单核细胞中核酸感受器IFI16的表达显著低于正常水平,且体外细胞试验初步验证了IFI16的表达与HBV复制之间的相关性,但其具体机制尚未明确。本文旨在明确IFI16在HBV的复制与表达过程中所发挥的作用,以及诱导肝细胞内固有免疫应答的分子机制,为寻找抗HBV免疫治疗靶点及新药研发提供思路。方法:采用p BS-HBV1.3和IFI16质粒共转染Hep G2细胞,ELISA检测细胞培养上清中HBs Ag和HBe Ag的表达,RT-q PCR检测HBV m RNA的表达,验证IFI16对HBV的抑制作用,并在HBV稳定转染模型Hep AD38细胞和HBV感染模型Hep G2-NTCP细胞中加以验证。将IFI16和STING共转染入Hep G2细胞或Hep AD38细胞中,ELISA和RT-q PCR检测IFI16与STING对于HBV的抑制是否具有协同作用,并在HBV刺激作用下,采用RT-q PCR验证STING-TBK1-IR...

【文章页数】：62 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图1.HepG2细胞中IFI16过表达可抑制HBV的复制与表达

华中科技大学硕士学位论文三．结果1．IFI16抑制HepG2细胞中HBV的表达为了验证HBV的复制与表达是否受IFI16表达的影响，我们采用HepG2细胞系进行了试验。将pEnter-IFI16表达质粒或其对照载体pEnter分....

图2.HepG2细胞中IFI16与STING可协同抑制HBV的表达与复制

3．IFI16对HBV的抑制效应与STING信号通路的激活有关为了进一步探究IFI16与STING信号转导通路之间存在何种作用，我们在HepG2细胞中检测了该通路中关键分子TBK1、IRF3及IFN-的mRNA表达，发现当HBV刺激时，IFI1....

图3.HepG2细胞中IFI16通过STING通路激活固有免疫

4．IFI16可抑制HepAD38细胞中HBV的表达，且该效应与STING信号通路的激相关由于上述实验主要采用的是质粒瞬时转染的技术，可能存在转染效率的差异，为排除转染效率的影响，我们采用了HBV稳定表达的细胞株HepAD38来验证上述结论在HepAD3....

图4.HepAD38细胞中IFI16过表达可抑制HBV的表达

华中科技大学硕士学位论文胞培养上清液进行HBsAg和HBeAg的ELISA检测，48h提取细胞总RNA，对HBVmRNA进行RT-qPCR检测，观察结果发现，与对照组相比IFI16与STING共转染组HBsAg、HBeAg和....

本文编号：3933815