NF-κB乙酰化介导低氧条件下DDAH1基因的表达调控

发布时间：2023-10-16 20:39

　　前言:心脑血管疾病(Cardio-cerebrovascular disease,CCVD)是一类由遗传和环境共同作用导致的多因素疾病,已成为全球较常见的死因。血管的病理学改变如血管壁血脂的沉积、慢性的炎症反应和血管平滑肌的增生等,会导致局部组织的缺血缺氧。有研究发现缺氧可以导致舒血管因子一氧化氮(NO)产生量的增加。NO是调节血管舒缩功能的主要调节剂,在血管内环境稳定中起关键作用,它由一氧化氮合酶(NOS)酶产生。非对称性二甲基精氨酸(Asymmetric dimethylarginine,ADMA)是一种内源性NOS抑制剂,是心血管死亡率和慢性肾脏疾病进展的危险因素。循环中的ADMA主要由二甲基精氨酸二甲胺水解酶(Dimethylarginine dimethylaminohydrolase,DDAH)降解。DDAH有两种亚型,包括DDAH1和DDAH2,研究显示DDAH1是降解ADMA的关键酶,并有研究表明DDAH1启动子区存在着几个脂类代谢和炎症相关的转录因子作用位点。NF-κB是一种参与介导细胞炎症反应的核转录因子,缺氧会在不同程度上引起细胞组织的炎症反应,同时低氧条件下NF...

【文章页数】：64 页

【学位级别】：硕士

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摘要
Abstract
英文缩略语
1 前言
2 材料和方法
    2.1 细胞系
    2.2 主要试剂和仪器
        2.2.1 主要试剂
        2.2.2 主要仪器
    2.3 生物信息学网址和计算机分析软件
    2.4 实验方法
        2.4.1 细胞培养
        2.4.2 细胞总RNA的提取
        2.4.3 cDNA合成和Real-timePCR反应
        2.4.4 WesternBlot
        2.4.5 荧光素酶表达载体的构建
        2.4.6 荧光素酶报告基因活性检测
        2.4.7 ChIP
        2.4.8 DNA结合实验及WesternBlot
        2.4.9 IP结合WesternBlot
        2.4.10 统计学数据分析
3 结果
    3.1 低氧对DDAH1表达水平的影响
    3.2 DDAH1启动子区NF-κB反应元件的预测与鉴定
        3.2.1 DDAH1启动子区NF-ΚB反应元件的预测与荧光素酶表达载体的构建
        3.2.2 CHIP实验体内鉴定NF-κB与DDAH1启动子区NF-κB反应元件结
        3.2.3 DNA结合实验及westernBlot实验体外鉴定NF-κB与DDAH1启动子区NF-κB反应元件结合
    3.3 低氧处理对NF-κB乙酰化水平的影响
    3.4 乙酰化对DDAH1表达的影响
    3.5 低氧处理及乙酰化对DDAH1表达的影响
4 讨论
5 结论
本研究创新性的自我评价
参考文献
综述
    参考文献
攻读学位期间取得的研究成果
致谢
个人简历



本文编号：3854612