铜富集芽孢杆菌HNU1的鉴定及其应用研究

发布时间：2024-04-23 01:19

　　铜是动植物生长发育所必需的一种微量元素,其缺乏或过量都会对生物体产生相应的损伤。农业土壤中存在的高浓度铜能通过食物链进行传播和累积,对生态环境安全和人类健康造成威胁。微生物修复法是土壤重金属污染的修复方法之一,具有成本低、操作简单和无二次污染等特点。但是微生物菌株稳定性差和修复机制不清楚制约其大规模应用。为了筛选新工程菌株和阐明微生物肥料对铜污染土壤的修复机制,本研究通过分子生物学方法、生理生化特征以及形态学鉴定一株铜富集细菌HNU1菌株;采用单因素和正交设计试验方法筛选出HNU1菌株的最适培养条件和最适培养基成分;采用单因素试验确定HNU1菌株对铜离子的吸附容量;采用固态发酵法制备微生物肥料;采用盆栽试验分析微生物肥料对铜胁迫下的小白菜的促生长作用和机制。结果如下:1、HNU1菌株是由海南大学重点生物学实验室从海南儋州土壤中分离纯化的芽孢杆菌菌株,命名为HNU1。采用细菌16S r DNA通用引物对27f和1492r以及gyr B基因的引物对UP1和UP2r对HNU1菌株的基因组DNA进行PCR扩增并将所获得的序列在NCBI上比对,HNU1菌株的两个基因序列与解淀粉芽孢杆菌的最高同源...

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图1技术路线Figure1Technologyroadmap

铜富集芽孢杆菌HNU1的鉴定及其应用研究61.5技术路线图1技术路线Figure1Technologyroadmap

图2HNU1菌株的菌落形态及显微镜下的菌体形态

3结果与分析3.1HNU1菌株鉴定3.1.1HNU1菌株的形态特征在37℃培养24h后，观察平板上的菌落形态。如图2-a所示，HNU1菌株在LB平板上形成的菌落呈圆形或近似圆形，在生长前期时的菌落表面光滑湿润、边缘整齐、呈乳白色；在生长后期时菌....

图3菌株HNU1基于16SrDNA基因序列构建的系统进化树

海南大学硕士学位论文19图3菌株HNU1基于16SrDNA基因序列构建的系统进化树Figure3PhylogenetictreeofstrainHNU1basedon16SrDNAgenesequence将测序得到的gyrB基因序列上传至NCBI中进行相似性分析，结果表明，菌株H....

图4菌株HNU1基于gyrB基因序列构建的系统进化树

海南大学硕士学位论文19图3菌株HNU1基于16SrDNA基因序列构建的系统进化树Figure3PhylogenetictreeofstrainHNU1basedon16SrDNAgenesequence将测序得到的gyrB基因序列上传至NCBI中进行相似性分析，结果表明，菌株H....

本文编号：3962411