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连作丹参根际土壤邻苯二甲酸与立枯丝核菌相互作用及其协同致害机理研究

发布时间:2024-01-16 19:50
  目的:1、探讨邻苯二甲酸与立枯丝核菌菌丝生长的相互作用;2、邻苯二甲酸与立枯丝核菌共培养体系对水培丹参的致害作用及其作用机理。通过以上两个方面的研究证明邻苯二甲酸介导立枯丝核菌的生长,进而影响重茬丹参的生长代谢,导致其连作障碍发生。通过本研究可阐明邻苯二甲酸介导下土壤微环境的变化规律及相互作用机制,研究结果对消减丹参连作障碍,提升药材产量和品质方面具有重要理论指导意义,同时也为其他根类药材连作障碍的消减提供重要借鉴。方法:1、通过气相色谱法(Gas Chromatography,GC)确定丹参植株体内所含邻苯二甲酸酯类化合物;通过室内菌丝生长抑制实验,研究邻苯二甲酸对立枯丝核菌菌丝生长的作用及临界浓度;采用高效液相色谱法(High Performance Liquid Chromatography,HPLC)测定菌丝生长抑制实验中培养体系在菌丝生长前后邻苯二甲酸含量的变化。2、加入外源性的邻苯二甲酸介导立枯丝核菌生长后的共培养体系,测定水培丹参地上部与地下部的超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)活性和丙二醛(MDA)含量,研究邻苯二甲酸与立枯丝核菌共培养体系对丹参抗氧化系统的...

【文章页数】:72 页

【学位级别】:硕士

【文章目录】:
摘要
abstract
引言
第一章 文献综述
    1 丹参概述
    2 连作障碍形成的原因及影响
        2.1 土壤环境及理化性质的改变
            2.1.1 对植物的影响
            2.1.2 消减措施
        2.2 土壤微生物种群的改变
            2.2.1 对植物的影响
            2.2.2 消减措施
        2.3 酚酸类自毒物质对植物的影响
            2.3.1 影响种子萌发
            2.3.2 影响植物的生长
            2.3.3 影响药材质量
        2.4 酚酸类自毒物质对根际微生物的影响
            2.4.1 对细菌的影响
            2.4.2 对真菌的影响
    3 立枯丝核菌对连作障碍的影响
第二章 邻苯二甲酸来源及其对立枯丝核菌菌丝生长影响研究
    1 材料与仪器
        1.1 材料与试剂
        1.2 仪器
    2 方法
        2.1 丹参植株内邻苯二甲酸酯类化合物提取与分离
            2.1.1 样品溶液的制备
            2.1.2 标准品溶液的制备
            2.1.3 GC分析条件
        2.2 邻苯二甲酸浓度实验
        2.3 立枯丝核菌代谢物提取与分析
            2.3.1 立枯丝核菌代谢物提取
            2.3.2 HPLC检测条件
            2.3.3 对照品溶液的制备
            2.3.4 标准曲线的绘制
            2.3.5 样品中邻苯二甲酸含量测定
    3 结果与分析
        3.1 丹参样品中邻苯二甲酸酯类成分分析
        3.2 PDA培养基培养立枯丝核菌
        3.3 PDB培养基培养立枯丝核菌
        3.4 PDB培养基中立枯丝核菌代谢物分析
    4 小结
第三章 邻苯二甲酸与立枯丝核菌共培养体系对丹参生理特性的影响
    1 材料与仪器
        1.1 材料
        1.2 试剂
        1.3 Hoagland营养液
        1.4 仪器
    2 方法
        2.1 丹参种苗的培养
        2.2 水培丹参生物量
        2.3 水培丹参SOD活性
        2.4 水培丹参POD活性
        2.5 水培丹参MDA含量
    3 结果与分析
        3.1 水培丹参生物量
        3.2 丹参SOD、POD活性与MDA含量
    4 小结
第四章 邻苯二甲酸介导立枯丝核菌共培养体系对丹参叶片Unigene表达的影响
    1 样品的收集和准备
        1.1 RNA的提取与检验
        1.2 文库的构建与质检
        1.3 上机测序
    2 数据分析
        2.1 转录组数据质量分析
        2.2 转录本的拼接及Corset层次聚类
        2.3 转录本质量评估
    3 结果
        3.1 不同处理下丹参叶片差异表达基因GO分类及富集分析
        3.2 不同处理下丹参叶片差异表达基因KEGG分类及富集分析
    4 讨论
        4.1 植物病原菌互作信号通路
        4.2 邻苯二甲酸与立枯丝核菌共培养体系胁迫对CML的影响
        4.3 邻苯二甲酸与立枯丝核菌共培养体系胁迫对CNGCs的影响
    5 小结
第五章 邻苯二甲酸介导立枯丝核菌共培养体系对丹参根部Unigene表达的影响
    1 样品的收集和准备
        1.1 RNA的提取与检验
    2 数据分析
        2.1 转录组数据质量分析
    3 结果
        3.1 不同处理下丹参根部差异表达基因GO分类及富集分析
        3.2 不同处理下丹参根部差异表达基因KEGG分类及富集分析
            3.2.1 酚酸类化合物合成途径
            3.2.2 木质素合成途径
    4 小结
第六章 结语
关于本研究的下一步思考
参考文献
致谢
硕士期间发表论文



本文编号:3879128

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