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鮸鱼microRNA-21对IL1R1的免疫调控机制研究

发布时间:2024-04-20 10:03
  先天性免疫(Innate Immune)是生物体抵御和清除入侵病原体的第一道防线,主要起防御、监视和维持内环境稳定的作用。免疫系统具有双向调节作用,即能清除病原体的入侵,又能防止免疫系统紊乱时发生过度免疫反应,损伤自身细胞。IL1R1(Interleukin-1 receptor 1)是细胞表面重要的免疫基因,它是白细胞介素-1(IL-1)的高亲和力受体,且在生物体炎症反应和免疫信号转导过程中起重要作用。基于该受体在免疫系统中所起的重要作用,通过调控IL1R1的表达来调节生物体免疫应答的研究也就显得尤为重要。近年研究发现了一种长22-24nt的短链非编码microRNA,它可以通过特异性约4-8个碱基的序列与靶基因的3’UTR区特异序列互补配对,进而阻断靶基因mRNA的翻译,它还可以调节机体免疫系统。鮸鱼作为重要的水产经济养殖物种,因其具有重要的食用和药用价值而广受欢迎。在本文中,我们研究了鮸鱼miR-21对其靶基因鮸鱼IL1R1的负调控作用:实验方法:主要使用了质粒构建、双荧光素酶报告基因实验、Western Blot等实验方法研究两者关系;最终得出结论:miR-21可以靶向负调控I...

【文章页数】:54 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

图3-1不同物种pre-miR-21序列的比对(A)和系统发生树构建(B)

图3-1不同物种pre-miR-21序列的比对(A)和系统发生树构建(B)

鮸鱼microRNA-21对IL1R1的免疫调控机制研究22第三章实验结果及讨论3.1pre-miR-21系统发育树分析我们对来自鱼类中11个不同物种的pre-miR-21茎环序列进行了比对研究,我们发现这11个物种的pre-miR-21序列共享一个与成熟miR-21相对应的高保....


图3-2-1mmi-miR-21可以靶向调控的基因Fig.3-2-1Thepotentialgenesweretargetingbymmi-miR-21havebeenpredictedusingthesoftwareofmiRandaandTargetScan

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23图3-2-1mmi-miR-21可以靶向调控的基因Fig.3-2-1Thepotentialgenesweretargetingbymmi-miR-21havebeenpredictedusingthesoftwareofmiRandaandTargetScan为了验证miR....


图3-2-2IL1R1-3"UTR野生型和突变型pmri-GLO质粒构建Fig.3-2-2TheIL1R1-3’UTRsequencewasinsertedintothepmriGLOvectortoconstructthe

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图3-3-1miR-21模拟体(A)和pre-miR-21质粒(B)对IL1R1-3’UTR野生型和突变体的作用Fig.3-3-1IL1R1-3’UTR(WT-UTR)wasco-transfectedintoEPCcellswithmiR-21mimics,control

图3-3-1miR-21模拟体(A)和pre-miR-21质粒(B)对IL1R1-3’UTR野生型和突变体的作用Fig.3-3-1IL1R1-3’UTR(WT-UTR)wasco-transfectedintoEPCcellswithmiR-21mimics,control

iR-21序列,并将其插入到pcDNA3.1载体中。然后,我们将pre-miR-21质粒和IL1R1-3’UTR-WT共转染至EPC细胞中,转染后24h检测细胞荧光素酶报告基因活性,同时我们将pre-miR-21质粒和IL1R1-3’UTR-MT共转染至EPC细胞中,转染后24h....



本文编号:3959253

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