山丹丹原生质体分离初探

发布时间：2023-05-31 22:27

　　山丹丹(Lilium pumilum DC.)是集观赏、食用和药用功能于一体的百合科百合属植物,因耐寒旱、耐盐碱能力强成为百合属植物育种的优良资源来源,但百合属植物有性杂交育种时存在不亲和性,严重降低山丹丹基因资源的利用效率。原生质体是缺失细胞壁、具有植物全套的遗传基因的活性细胞团,原生质体融合为植物育种提供新的途径,原生质体则为开展植物细胞水平、分子水平上的基础研究提供良好的实验平台,因此开展山丹丹原生质体的研究对于百合属植物优化育种、山丹丹种质资源理论研究均有重要的意义。为获得满足一定数量和活性要求的山丹丹原生质体。本研究以山丹丹鳞片诱导的愈伤组织为试验材料,设计正交试验探究纤维素酶、果胶酶和甘露醇对山丹丹原生质体产量和活性的影响,设计单因素试验探究酶解时间、纯化方式、预处理方式和培养条件对山丹丹原生质体分离和培养的影响,优化了山丹丹原生质体分离条件,进而建立了高效高产的山丹丹原生质体分离体系,为山丹丹的种质资源高效利用和理论研究提供支持和参考,具体工作如下:1.山丹丹原生质体分离最佳酶解时间为6 h,原生质体产量3.46×10⁵个/mL,活性为39.17%。...

【文章页数】：73 页

【学位级别】：硕士

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摘要
abstract
第一章 前言
    1.1 百合属简介
    1.2 百合属研究现状
    1.3 百合属原生质体研究现状
        1.3.1 百合属原生质体研究意义
        1.3.2 百合属原生质体研究进展
    1.4 百合属原生质体分离与培养研究现状
        1.4.1 原生质体分离方法
        1.4.2 影响原生质体分离的因素
        1.4.3 原生质体培养方法
        1.4.4 影响原生质体培养的因素
    1.5 本研究的目的和意义
第二章 研究内容与方法
    2.1 研究内容
        2.1.1 原生质体分离条件的优化
        2.1.2 原生质体纯化条件的优化
        2.1.3 原生质体初步培养的探索
    2.2 试验方法
        2.2.1 供试材料培养
        2.2.2 原生质体分离方法
        2.2.3 原生质体纯化方法
        2.2.4 原生质体培养方法
    2.3 测定指标及方法
        2.3.1 原生质体数目测定
        2.3.2 原生质体活力测定
        2.3.3 原生质体分裂频率测定
    2.4 数据统计分析
第三章 结果与分析
    3.1 材料培养结果
    3.2 原生质体分离条件的优化
        3.2.1 酶解时间对山丹丹原生质体产量和活性的影响
        3.2.2 最佳组合酶液组合的确定
        3.2.3 酶组合对山丹丹原生质体产量和活性的影响
        3.2.4 渗透压浓度对山丹丹原生质体产量和活性的影响
        3.2.5 预处理方式对山丹丹原生质体产量和活性的影响
    3.3 原生质体纯化条件的优化
    3.4 原生质体初步培养条件的探索
第四章 讨论
    4.1 酶液组合对原生质体产量和活性的影响
    4.2 酶解时间对原生质体产量和活性的影响
    4.3 渗透压对原生质体产量和活性的影响
    4.4 预处理方式对原生质体产量和活性的影响
    4.5 离心转速和离心时间对原生质体分离的影响
第五章 结论
参考文献
致谢
攻读学位期间的研究成果



本文编号：3826121