PTBP1等基因在肝癌细胞恶性增殖中的作用及与相关中医证候的关系

发布时间：2024-04-28 00:48

　　目的在导师团队以往中医药防治肝癌研究的基础上,选择若干在肝癌细胞恶性增殖时表达量上调的基因,综合采用RNA干扰等实验技术,探索研究这些基因在肝癌细胞恶性增殖中的作用,以期丰富肝癌发病和恶性增殖机制,及肝癌热毒证发生的部分机制。方法主要包括:肝癌细胞的培养、目的基因干扰质粒的制备、脂质体瞬时转染干扰质粒、沉默目的基因后细胞增殖能力的MTT法检测、沉默目的基因后RT-q PCR的检测基因表达量的变化、沉默目的基因后Western blot检测蛋白表达的变化、沉默目的基因后流式细胞技术对细胞周期和细胞凋亡的检测、相关方法学实验探讨和改进以及文献资料查阅等。结果(1)成功构建了10个目的基因的干扰质粒。(2)荧光对照显示质粒转染成功。(3)转染si RNA后72h,与正常组相比PTBP1、RPS18、RPL13A、RPL37A基因沉默组细胞数量明显减少。(4)转染si RNA后72h,PTBP1、RPS18、RPL13A、RPL37A各基因相对表达量与阴性相比均不同程度下调,且下调幅度较明显。(5)转染si RNA后72h,与对照组相比PTBP1、RPS18、RPL13A、RPL37A各基因沉...

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【学位级别】：博士

【部分图文】：

图1-1酶切质粒电泳图

上海中医药大学博士学位论文8（2）pSilencer2.1线性质粒载体的电泳后，置凝胶于长波紫外透射仪上，可见清晰的呈淡橘红色的标准品（若干梯度条带）；生物电泳图像分析系统拍照，可见清晰的亮条带，酶切成功的线性质粒DNA比未切环状质粒DNA迁徙速度慢，条带较为靠后，见图1-1。图....

图1-2线性质粒载体回收浓度纯度检测图

上海中医药大学博士学位论文8（2）pSilencer2.1线性质粒载体的电泳后，置凝胶于长波紫外透射仪上，可见清晰的呈淡橘红色的标准品（若干梯度条带）；生物电泳图像分析系统拍照，可见清晰的亮条带，酶切成功的线性质粒DNA比未切环状质粒DNA迁徙速度慢，条带较为靠后，见图1-1。图....

图1-3重组质粒转化感受态细胞菌落（5）各基因中量制备菌液扩增成功，所得质粒DNA浓度高，质量佳，见表1-51-4

上海中医药大学博士学位论文8（2）pSilencer2.1线性质粒载体的电泳后，置凝胶于长波紫外透射仪上，可见清晰的呈淡橘红色的标准品（若干梯度条带）；生物电泳图像分析系统拍照，可见清晰的亮条带，酶切成功的线性质粒DNA比未切环状质粒DNA迁徙速度慢，条带较为靠后，见图1-1。图....

图1-4各基因中抽结果8348.9293.3329.1

上海中医药大学博士学位论文8（2）pSilencer2.1线性质粒载体的电泳后，置凝胶于长波紫外透射仪上，可见清晰的呈淡橘红色的标准品（若干梯度条带）；生物电泳图像分析系统拍照，可见清晰的亮条带，酶切成功的线性质粒DNA比未切环状质粒DNA迁徙速度慢，条带较为靠后，见图1-1。图....

本文编号：3965943