卵母细胞中丙酮酸脱氢酶激酶4的作用及其机制研究

发布时间：2024-04-19 00:15

　　研究背景和研究目的:哺乳类动物出生后,初级卵母细胞停滞在第一次减数分裂的前期,含有较大的核,为生发泡(GV)。研究显示,环磷酸腺苷(c AMP)可通过卵丘颗粒细胞与卵母细胞间的缝隙连接而在这两种细胞间穿梭流动,对卵母细胞维持减数分裂阻滞状态起到促进作用。性成熟后,卵泡生长启动,卵母细胞内c AMP水平下降,促卵母细胞成熟因子表达增加,初级卵母细胞开始生长并完成第一次减数分裂,生发泡破裂,排出第一极体,而在排卵后停滞于第二次减数分裂的中期即MⅡ期。卵母细胞成熟主要包括核成熟及质成熟,二者只有同步化,卵母细胞的发育才能最优化。卵母细胞发育与成熟的每个细胞事件,都依赖细胞内能量支持,线粒体是其能量工厂。卵丘细胞来源的丙酮酸是卵母细胞三羧酸循环(TAC)能量代谢的主要原料;而葡萄糖本身和/或糖代谢中间产物、脂肪酸和氨基酸,也可能是卵母细胞的能量代谢的底物。尤其是葡萄糖中间代谢产物-乙酰辅酶A,可转入线粒体进行氧化呼吸,合成大量ATP。脂肪酸β氧化(FAO)是卵母细胞成熟的另一个重要的能量来源。一分子脂肪酸氧化可氧化在线粒体内产生106个ATP而一分子葡萄糖大约为30个ATP,因而脂肪酸氧化是卵...

【文章页数】：99 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

图１．卵母细胞内Ｈ）Ｋ４的表达Ａ．年轻小鼠ＧＶ期卵母细胞ＰＤＫ４的含量较年轻小鼠Ｍ丨丨期??卵母细胞减少，差异有统计学意义（户＜〇．〇５）

低于年轻小鼠Ｍｉｌ期卵母细胞（ＰＣ０．０５）。而且，年??轻小鼠ＧＶ期的卵丘细胞ＰＤＫ４的含量较年轻小鼠Ｍ?ＩＩ期卵丘细胞减少，差异有统计??学意义（Ｐ＜〇．〇５）。髙龄小鼠ＭＩＩ期卵丘细胞ＰＤＫ４的表达水平明显低于年轻小鼠Ｍｉｌ??期卵丘细胞（户＜〇．〇５）。??Ａ?ＰＤＫ４?....

图２．?ＧＶ期卵母细胞显微注射ＰＤＫ４小干扰后ＰＤＫ４的表达年轻小鼠ＧＶ期卵母细胞显微??注射ＰＤＫ４小干扰后，通过免疫荧光检测发现注射ＰＤＫ４小干扰，卵母细胞ＰＤＫ４的表达下降??（Ｐ＜０．０５），干涉效率在５３％

结果?卵母细胞中丙酮酸脱氢酶激酶４的作用及其机制研究??的Ｍ２培养液孵育２４小时，通过免疫荧光检测ＰＤＫ４的表达。结果发现注射ＰＤＫ４??小干扰，卵母细胞ＰＤＫ４的表达下降（Ｐ＜０．０５），干涉效率在５３％。??ＰＤＫ４?Ｈｏｅｃｈｓｔ?Ｍｅｒｇｅ??測■■■??ｓｉＲＮＡ－ｐｄ....

图３．ＰＤＫ４干涉后对卵母细胞成熟的作用Ａ．年轻小鼠ＧＶ期卵母细胞干涉ＰＤＫ４表达后，卵??母细胞０乂８０从８９．丨４％下降至５４．５５％（／＞＜０．０５）８．干涉？０！＾４表达后卵母细胞第一级体排出比??

卵母细胞中丙酮酸脱氢酶激酶４的作用及其机制研究?结果??Ａ?１００－１?Ｂ?１００－??一?Ｈ?ｈｈ?Ｓ８。－??ｆ：?■?ｉ?Ｓ：＿?．??Ｃｏｎ?ｓｉＲＮＡ－ｐｄｋ４?Ｃｏｎ?ｓｉＲＮＡ－ｐｄｋ４??图３．ＰＤＫ４干涉后对卵母细胞成熟的作用Ａ．年轻小鼠ＧＶ期卵母细胞干涉ＰＤＫ....

图４．?ＰＤＫ４干涉后卵母细胞ＲＯＳ水平增髙年轻小鼠ＧＶ期卵母细胞显微注射ＰＤＫ４小干??扰后在含有减数分裂抑制剂ＩＢＸＭ的Ｍ２培养液孵育２４小时，后在无ＩＢＸＭ的Ｍ２培养液孵育??２１??

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本文编号：3957940