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1RS.1BL易位染色体的1RS特异基因和串联重复序列的表达差异研究

发布时间:2024-03-12 03:28
  小麦(Triticum aestivum L.,AABBDD,2n=6x=42)是一种重要的粮食作物,黑麦1RS取代小麦1BS形成的1RS.1BL易位染色体,因其具有高产抗病虫等特性,被广泛应用于小麦育种。然而,目前人们对1RS.1BL易位染色体的关注点主要集中在拓宽1RS.1BL易位系的遗传基础和开发1RS特异分子标记方面,对于1RS基因与小麦遗传背景互作机制的相关研究却还不够深入。为此,寻找在小麦背景中,具有1RS特异表达特性的基因有助于了解1RS与小麦背景相互作用的机制。此外,利用1RS.1BL缺失系,可以进行1RS特异基因的区段定位,有助于了解1RS不同区段的功能。通过重复序列分析1RS的结构特点,也有利于了解1RS的功能特性。本实验利用非变性荧光原位杂交(ND-FISH)技术对绵阳11(MY11)与黑麦Kustro的杂交后代进行鉴定,筛选出1RS.1BL易位系和1RS.1BL缺失系;通过SLAF-Seq和RNA-Seq技术开发新的1RS的特异标记,结合前人报道的1RS特异标记,利用缺失系材料对这些标记进行1RS的区段定位;同时通过以cDNA为模板的PCR扩增,从中筛选出与1R...

【文章页数】:108 页

【学位级别】:博士

【文章目录】:
摘要
ABSTRACT
1.文献综述
    1.1 黑麦在小麦中的应用
    1.2 1RS.1BL易位系的来源及其在小麦育种中的应用
    1.3 1RS.1BL的遗传多样性
    1.4 1RS.1BL易位系对小麦的正面影响
    1.5 1RS.1BL易位系对小麦的负面影响
        1.5.1 Sec-1基因对小麦的影响
        1.5.2 1RS基因的选择性表达
    1.6 1RS与小麦遗传背景的互作
    1.7 1RS特异分子标记的开发
        1.7.1 随机DNA标记(RDMs)
        1.7.2 基因靶向标记(GTMs)
    1.8 串联重复序列
        1.8.1 重复序列的分类
        1.8.2 1RS的串联重复序列
        1.8.3 串联重复序列的转录
    1.9 本研究的目的和意义
2.材料与方法
    2.1 实验材料
    2.2 实验方法
        2.2.1 利用非变性荧光原位杂交鉴定实验材料
        2.2.2 利用SLAF-Seq开发1RS的特异标记
        2.2.3 利用RNA-Seq开发1RS的特异标记
        2.2.4 前人报道的1RS标记的特异性验证
        2.2.5 1RS特异标记的区段定位
        2.2.6 筛选与1RS特异表达基因相关的标记
        2.2.7 序列的克隆及测序
        2.2.8 串联重复序列的表达
        2.2.9 考察1RS.1BL缺失系的农艺性状
3.结果与分析
    3.1 构建1RS.1BL缺失系
        3.1.1 15T-1的鉴定结果
        3.1.2 15T-2的鉴定结果
        3.1.3 15T-3的鉴定结果
    3.2 开发1RS特异分子标记
        3.2.1 利用SLAF-Seq开发1RS特异的分子标记
        3.2.2 利用RNA-Seq开发1RS的特异分子标记
    3.3 对1RS特异分子标记的多态性检测
    3.4 对前人报道的1RS标记的特异性验证
    3.5 1RS特异分子标记的染色体区段定位
    3.6 15T-1和15T-2缺失位点的鉴定
    3.7 筛选1RS特异表达基因相关的标记
    3.8 基因140、143、PE005特异表达区段的定位
    3.9 基因140和基因143的表达差异的分析
    3.10 串联重复序列pSc200和pSc250的表达差异研究
        3.10.1 pSc200在1RS.1BL缺失系中的表达情况
        3.10.2 pSc250在1RS.1BL缺失系中的表达情况
    3.11 考察1RS.1BL缺失系的农艺性状
4 讨论
    4.1 1RS.1BL易位系的鉴定方法
        4.1.1 生化鉴定
        4.1.2 分子鉴定
        4.1.3 细胞学鉴定
    4.2 小麦近缘种属染色体缺失/变异系的创制与应用
    4.3 开发与具有1RS特异表达特性的基因关联的标记
        4.3.1 利用SLAF-Seq开发与1RS特异基因关联的标记的可行性
        4.3.2 利用RNA-Seq开发与1RS特异基因关联的标记的可行性
        4.3.3 引物G-1RS-143在黑麦中的多态性
    4.4 1RS不同区段的功能
    4.5 小麦-黑麦杂交后代中的基因组变异
    4.6 机械敏感性离子通道蛋白的功能
    4.7 热激蛋白的功能
    4.8 串联重复序列的表达差异
5 结论
参考文献
致谢
附录
作者简历



本文编号:3926468

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