转录因子GATA3在出生后小鼠耳蜗支持细胞中的作用

发布时间：2023-11-08 19:24

　　人Gata3基因单倍剂量不足可以引起甲状旁腺功能减低-感音神经性耳聋-肾发育不良(HDR)综合征,也称为Barakat综合征。其中感音神经性耳聋是最常见的表型。这提示Gata3可能对耳蜗的发育至关重要。实验室前期研究表明,胚胎发育早期阶段条件性敲除内耳中的Gata3会导致耳蜗无法正常形成前感觉区域,耳蜗螺旋神经节神经元(SGNs)无法正常投射并大量凋亡,这提示Gata3对耳蜗前感觉区域的形成及螺旋神经节神经元的存活起着重要的作用。但是,前感觉区域无法正常形成和SGNs大量凋亡限制了我们对Gata3在耳蜗发育后期感觉上皮中的作用的研究。因此Gata3在分化后的毛细胞(HCs)和支持细胞(SCs)中的作用尚不清楚。本文我们使用了他莫昔芬诱导的Sox2-CreERT2工具小鼠,特异性敲除出生后小鼠耳蜗SCs中的Gata3,来探究Gata3在出生后小鼠耳蜗SCs中的作用。结果表明Gata3在出生后小鼠耳蜗SCs中持续表达。在新生小鼠耳蜗SCs中敲除Gata3后,SCs数目增多,大上皮嵴(GER)区域扩增。但是,在成熟小鼠耳蜗中,Gata3敲除后无明显表型。EdU细胞增殖检测结果表明,新生小鼠耳...

【文章页数】：105 页

【学位级别】：博士

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致谢
摘要
Abstract
英文缩略词
第一章 文献综述
    1.1 内耳结构及发育
    1.2 Notch信号通路在耳蜗发育中的作用
    1.3 FGF信号通路在耳蜗发育中的作用
    1.4 Wnt信号通路在耳蜗发育中的作用
    1.5 耳蜗出生后发育及支持细胞的增殖潜能
    1.6 总结
第二章 GATA3 在出生后小鼠耳蜗支持细胞中的表达
    2.1 实验材料与方法
        2.1.1 实验动物
        2.1.2 主要试剂及仪器
        2.1.3 实验方法
    2.2 实验结果
        2.2.1 GATA3 在新生小鼠耳蜗SCs中的表达
        2.2.2 GATA3 在成熟耳蜗SCs中的表达
    2.3 讨论
第三章 出生后小鼠耳蜗支持细胞条件性敲除Gata3 对小鼠耳蜗管发育的影响
    3.1 实验材料与方法
        3.1.1 实验动物
        3.1.2 主要试剂及仪器
        3.1.3 实验方法
    3.2 实验结果
        3.2.1 新生小鼠耳蜗SCs条件性敲除Gata3 对耳蜗管的影响
        3.2.2 成年小鼠耳蜗SCs条件性敲除Gata3 对耳蜗管的影响
        3.2.3 Gata3 在新生小鼠耳蜗SCs失活后引起IPC、IBC和 GER增殖
    3.3 讨论
第四章 GATA3 通过调控p27^kip1的表达维持耳蜗支持细胞的静息状态
    4.1 实验材料与方法
        4.1.1 实验动物
        4.1.2 主要试剂及仪器
        4.1.3 实验方法
    4.2 实验结果
        4.2.1 条件性敲除Gata3 引起IPC、IBC和 GER中 p27^kip1表达下调
        4.2.2 GATA3 可能通过直接结合p27^kip1的启动子区域调控p27^kip1的表达
    4.3 讨论
第五章 Gata3 条件性敲除小鼠耳蜗支持细胞中转录组的变化
    5.1 实验材料与方法
        5.1.1 实验动物
        5.1.2 主要试剂及仪器
        5.1.3 实验方法
    5.2 实验结果
    5.3 讨论
第六章 全文总结
    6.1 主要研究内容与结果
    6.2 课题特色与创新
    6.3 研究的不足之处及展望
参考文献
附录一 :常用溶液配制
附录二 :pcDNA3-Gata3和p GL3-p27kip1 promoter重组质粒酶切鉴定和测序分析
附录三 :RNA-seq差异表达的基因
作者简介



本文编号：3861592