HaTRET1基因的克隆及转基因烟草的耐旱性分析

发布时间：2024-04-15 02:36

　　海藻糖对多种生物尤其是对某些极端耐受脱水的昆虫具有重要的保护作用,而海藻糖转运蛋白(trehalose transporter1, TRET1)在促进海藻糖的运输、分配中起关键作用。为了探究TRET1在植物抗干旱胁迫中的作用,本研究通过RT-PCR (Reverse transcription-polymerase chain reaction)克隆得到棉铃虫(Helicoverpa armigera)海藻糖转运蛋白基因HaTRET1,将其转化烟草并鉴定,分别对转基因烟草和野生型烟草进行抗旱性分析。结果显示干旱胁迫下所有烟草植株脯氨酸(proline, Pro)和丙二醛(maleic dialdehyde, MDA)含量、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)和过氧化物酶(peroxidase, POD)活性均增加;其中转基因株系Pro、SOD和POD活性的增加量显著高于非转基因植株,而转基因株系中MDA的增加量显著低于非转基因植株。另外,在干旱胁迫下转基因烟草种子的发芽率(约为60%～70%)远高于野生型(<20%);转基因烟草叶片相对含水量和叶绿...

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【部分图文】：

图1不同处理时间HaTRET1基因的相对表达量

通过RT-PCR方法从棉铃虫幼虫cDNA中扩增得到一段1556bp的序列并将其连接至T载体，经测序及序列分析发现该序列包含一个1449bp的ORF(Openreadingframe)(命名为HaTRET1)，与棉铃虫Tret1-like(GenBank登录号....

图3HaTRET1跨膜螺旋结构分布

实验结果表明，水分充足和干旱条件下，转基因烟草的叶绿素含量均高于野生型(图10)。干旱胁迫下所有烟草的叶绿素含量均下降，但野生型烟草含量下降幅度显著大于转基因型，且转基因烟草中叶绿素a、叶绿素b和总叶绿素的含量均大于野生型。说明干旱对转基因烟草细胞光合器官的损伤程度较小。图2H....

图2HaTRET1与棉铃虫Tret1-like蛋白氨基酸序列对比

图3HaTRET1跨膜螺旋结构分布图4HaTRET1N-糖基化位点分布

图4HaTRET1N-糖基化位点分布

图2HaTRET1与棉铃虫Tret1-like蛋白氨基酸序列对比1.3.4干旱胁迫对烟草中Pro、MDA含量以及SOD、POD活性的影响

本文编号：3955603