基质金属蛋白酶—26在内质网应激中的细胞定位及功能

发布时间：2024-03-28 00:45

　　基质金属蛋白酶(Matrix metalloproteinases,MMPs)是一类锌离子依赖的肽链内切酶,可以引起炎症组织的破坏,是慢性炎症性疾病的标志物,而且能够降解基质膜和胶原,促进癌细胞的转移。但是当MMPs抑制剂类药物应用于癌症临床试验时会引起了很多副作用,这揭示了MMPs在炎症性疾病和癌症进程中具有新的生物学功能。MMP-26(Matrix metalloproteinase-26,MMP-26,或者Matrilysin-2)是MMPs家族最小的成员,与其他MMPs家族成员相比,尽管在结构上具有高度的相似性,但因其具有独特的种属和组织表达特异性、独特的细胞内定位以及独特的自激活机制等等,使得MMP-26在细胞内行使与其他MMPs家族成员不同的功能。内质网是真核细胞中重要的细胞器,是蛋白质合成、翻译后修饰、脂质合成、钙离子储存和维持钙离子稳态的重要场所。当内质网的功能和需求之间出现紊乱时会产生内质网压力,并启动内质网压力应激。许多生理和病理进程都伴随着内质网压力的产生,而内质网压力本身也可以导致和促进疾病的发生发展。在实验室的前期工作中,我们发现MMP-26特异性地定位于细胞...

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图1.2鼠源MMPs和它们的有益特性[28]

第一章绪论9图1.2鼠源MMPs和它们的有益特性[28]其他重要的凋亡调控器也会受到MMP的调控。这些调控器包括BH3相互作用域死亡拮抗剂（BID）、凋亡相关基因-2相互作用蛋白X（ALIX或程序性细胞死亡蛋白6）和细胞色素c。常见的凋亡前底物和抑制剂，在早期凋亡阶段中的MMP

图3.1构建了稳定表达GFP或MMP-26-GFP的HeLa细胞A.MMP-26-GFP表达细胞的明场及荧光成像，右下角显示的是单个细胞的

44蛋白，当压力产生时，ATF-6转移到Golgi体被分解成一个50kD的ATF-6N端片段[136]，在图3.2B中显示含有ATF-6N片段的密度梯度组分中不含有MMP-26，综合以上结果证明MMP-26主要位于内质网。图3.1构建了稳定表达GFP或MMP-26-GFP的HeL....

图3.2MMP-26定位于内质网A.MMP-26-GFP表达细胞，利用anti-GRP78抗体染色，共聚焦荧光显微镜成像；B.

第三章实验结果45Ca2+-ATPase抑制剂，通过抑制内质网内Ca2+-ATPase释放钙离子，导致内质网压力以及细胞凋亡；A23187(Ca2+离子载体)，能够删除内质网内的钙离子，细胞内钙离子的流出造成细胞内环境紊乱导致内质网压力；DTT(二硫苏糖醇，Dithiothrei....

图3.3MMP-26在内质网压力下内质网定位发生改变A.MMP-26-GFP在稳态下的细胞内定位；B.MMP-26-GFP在内质网压力诱导剂TM（5

46有文献报道当糖基化蛋白质的糖基化被抑制后本应该分泌到细胞外的蛋白质会由于糖基化不能正常进行而滞留在内质网，推测MMP-26-GFP由于糖基化被抑制导致并未发生定位的改变(图3.3B)。为了验证MMP-26-GFP是一个糖基化的蛋白质这种假设，利用糖基化抑制剂TM加药24h后检....

本文编号：3940747