杀鱼爱德华氏菌中Fur和EsrB对其生理和代谢的调控机制

发布时间：2024-03-30 12:45

　　杀鱼爱德华氏菌(Edwardsiella piscicida)是一种对水产养殖业极大危害的致病菌,其致病过程是一系列致病基因时空顺序表达的结果。Ⅲ型分泌系统(T3SS)和Ⅵ型分泌系统(T6SS)是目前已知的重要的毒力因子,而EsrA-EsrB双组分系统对T3SS及T6SS表达有关键调控作用,但EsrB单独在E.piscicida中对下游的调控还不明确。本文运用RNA-seq技术对DMEM培养条件下的E.piscicida EIB202的转录谱进行分析,筛选出618个基因的转录水平在△esrB中下调,而388个基因在其中上调。EsrB除了能上调T3SS和T6SS之外,还能上调铁摄取相关基因,这说明铁也参与了该病原菌毒力调控基因的表达。Fur蛋白为铁摄取调节子。在转录水平上,fur在WT中的表达量比在AesrB中显著上调4倍以上,表明EsrB对Fur具有上调作用。作为一种全局调控因子(global regulator),Fur严格抑制许多基因的表达,保证铁转运系统受到铁浓度的严格调控。本实验运用ChIP-seq技术,考察了E.piscicida EIB202中Fur在全基因组范围内的结合位...

【文章页数】：72 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图１．４不同病原菌中Ｔ３ＳＳ基因簇对化图ＩＫＩ??Ｆｉｇ．?１．４?Ｇｅｎｅｔｉｃ?ｏｒｇａｎｉｚａ?

主细胞的胞质中行使其功能。作为病原菌中重要的分泌系统，Ｔ３ＳＳ的功能是将毒力蛋??白分泌至宿主中，从而扰乱宿主细胞的一系列生理生化功能。在许多常见的重要的病原??菌中都编码有功能的Ｔ３ＳＳ，有些菌甚至含有几套Ｔ３ＳＳ?（图１．４）。Ｔａｎ等人的研究确定了??￡．知加Ｃ／沁ＰＰＤ１....

图1.5T6SS结构模型}67}

?内径为４?ｎｍ，能允许伸展状态下的分泌蛋白通过，而过于狭窄的ＶｇｒＧ的Ｈ能让蛋白通过，因此可能在Ｈｅｐ管组装的＂针头＂刺穿宿主细胞膜＾心后解离，通过Ｈｅｐ通道进入到宿主细胞中。霍乱弧菌的Ｔ化Ｓ的保守组分ＶＣＡ０１０９尾部基板的组分ｇｐ２５蛋白具有序列的相似性，因此可能具有溶菌酶....

图３．１突变株文库的构建流程??Ｆｉｇ．?３．１?Ｗｏｒｋｆｌｏｗ?ｏｆ?ｍｕｌ；ａｎｔ?ｌｉｂｒａｒｙ?ｃｏｎｓｔｒｕｃｔｉｏｎ．??

３．３．１转座子插入突变株文库的构建??突变株的构建采用接合方式，供体菌株为ＳＭ１０如ｚ＞：：ｐＭＫＧＲ，受体菌株为杀鱼爱??德华氏菌拉Ｂ２０２ＡＰ?（图３．：１）?口７］。??突＇楚株?巧阳?Ｕｍｕ?ＰＣＫ扩増?测Ｉ书??〇－口－?－面一而??１??Ｇ制ｉ??□?Ｉ确巧位点的炎....

图3.3Episeicida与V.alginoiyticus铁载体合成转运基因簇的比对Fig.3.3AlignmentofsiderophorerelatedgeneclusterbetweenEpiscicidaandY.alginolyticus

表；３．３?￡■．／ｊ／ｓｒＺｃ／舶与Ｋ?每扣０／抑’ｃｗｓ铁载体基因鎭蛋白的同源度??Ｔａｂｌｅ?３．３?Ｈｏｍｏｌｏｇｙ?ｏｆ?ｓｉｄｅｒｏｐｈｏｒｅ?ｐｒｏ化ｉｎｓ?ｂｅｔｗｅｅｎ?左．／７／ｓｃ／ｃ／抓?ａｎｄ?Ｋ?幻／各／ｎｏ／ｊ＾ｆ／ｃｗ??Ｐｒｏ?化?ｉｎ?Ｐｖｓ?....

本文编号：3942374