猪血多肽对建鲤抗氧化和免疫功能的影响
发布时间：2023-05-28 08:17
随着集约化养殖的迅猛发展, 水产养殖病害问题日益突出。为了防治水产动物疾病,抗生素被大量应用于水产养殖。由于抗生素的大量使用所导致的药物残留等问题,抗生素在国外许多国家受到严格的限制。一些抗生素在我国也已经被禁止使用,因此寻求能有效防治水产动物疾病、替代或减少抗生素使用的药物和饲料添加剂显得非常必要和紧迫。本研究通过体外和体内实验,探讨猪血多肽(Peptides from Swine Blood, PSB)对建鲤抗氧化和免疫功能的影响,为应用猪血多肽防治水产动物疾病提供理论依据。主要研究内容和结果如下：1.体外实验：采用密度梯度离心技术,分离纯化建鲤头肾细胞、头肾巨噬细胞和外周血白细胞。将不同浓度的猪血多肽加入到鲤头肾细胞、头肾巨噬细胞和外周血白细胞的体外培养体系中作用24 h, WST-1法测定细胞增殖,NBT还原法和Griess试剂显色法测定巨噬细胞的氧呼吸爆发活性和氮呼吸爆发活性。结果表明：浓度为20、40、80μg/mL的猪血多肽能显著提高外周血白细胞的增殖；浓度为40和80μg/mL的猪血多肽能显著增强头肾巨噬细胞的氧呼吸爆发活性和氮呼吸爆发活性；另外80μg/mL的猪血多肽...
【文章页数】：66 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
第一章 文献综述
1 生物活性肽研究进展
1.1 生物活性肽制备方法
1.1.1 通过体外酶水解蛋白质获得
1.1.2 通过模拟或者取实体动物胃肠道物消化前体蛋白获得
1.1.3 通过化学方法以及基因重组技术人工合成生物活性肽
1.2 生物活性肽的功能
1.2.1 调节胃肠道吸收矿物质和营养物质的功能
1.2.2 调节神经系统
1.2.3 调节心血管系统
1.2.4 调节免疫系统
1.2.5 调节机体的抗氧化功能
1.2.6 其他功能
1.3 生物活性肽在水产养殖中的研究进展应用
1.3.1 多肽在水产养殖中的研究进展
1.3.2 动物蛋白源活性肽在水产动物中的研究
2 猪血的研究进展
2.1 猪血的成分
2.2 猪血的开发和利用
2.2.1 在饲料上的利用
2.2.2 食品工业应用
2.2.3 在保健食品中的利用
2.2.4 制取多肽
3 鱼类细胞培养
3.1 鱼类细胞培养研究进展
3.2 细胞培养的形式
3.3 影响鱼类细胞培养的因素
3.3.1 温度
3.3.2 PH值和渗透压
3.3.3 培养基
3.3.4 添加成分
4 Toll样受体在水产动物免疫中的研究进展
5 实验目的和意义
第二章 猪血多肽的安全性评价分析
1 材料和方法
1.1 试验材料
1.2 实验设计
1.2.1 建鲤头肾细胞分离
1.2.2 猪血多肽体外安全性分析
1.2.3 猪血多肽体内安全性分析
1.3 数据统计
2 结果与分析
2.1 猪血多肽对建鲤头肾细胞活力的影响
2.2 猪血多肽体内安全性测定
3 讨论
第三章 猪血多肽对建鲤离体培养免疫细胞活性的影响
1 材料和方法
1.1 材料
1.1.1 实验用鱼
1.1.2 试剂和仪器
1.2 方法
1.2.1 建鲤外周血白细胞分离
1.2.2 建鲤头肾巨噬细胞的分离
1.2.3 建鲤头肾细胞的分离
1.3 免疫指标的测定
1.3.1 外周血白细胞增殖的测定
1.3.2 呼吸爆发活性测定
1.3.3 SOD活力的检测
1.4 数据分析
2 结果与分析
2.1 猪血多肽对建鲤外周血白细胞增殖的影响
2.2 猪血蛋白活性肽对建鲤头肾巨噬细胞氮呼吸爆发和氧呼吸爆发活性的影响
2.3 猪血多肽对建鲤离体头肾细胞SOD活性的影响
3 讨论
第四章 猪血多肽对鲤血清中免疫因子的影响
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 实验用鱼
1.1.2 试剂和仪器
1.2 方法
1.2.1 试验组别划分及处理
1.2.2 样品采集
1.2.3 免疫指标的测定
1.3 数据分析
2 结果与分析
2.1 猪血多肽对建鲤血清中IL-1β和TNF-α的影响
2.2 猪血多肽对建鲤血清中C3和C4的影响
2.3 猪血多肽对建鲤肝脏细胞TLR-4含量变化的影响
3 讨论
第五章 猪血多肽对建鲤抗氧化能力的影响
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 实验用鱼
1.1.2 试剂和仪器
1.2 方法
1.2.1 试验组别划分及处理
1.2.2 血清制备
1.2.3 血清蛋白含量以及生化指标活力测定
1.3 数据分析
2 结果与分析
2.1 猪血多肽对建鲤血清中TP和Alb含量的影响
2.2 猪血蛋白活性肽对建鲤血清中抗氧化能力的影响
2.3 猪血多肽对建鲤血清中AKP活性的影响
3 讨论
结论
参考文献
致谢
攻读学位期间发表的论文
附录
本文编号：3824275
【文章页数】：66 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
第一章 文献综述
1 生物活性肽研究进展
1.1 生物活性肽制备方法
1.1.1 通过体外酶水解蛋白质获得
1.1.2 通过模拟或者取实体动物胃肠道物消化前体蛋白获得
1.1.3 通过化学方法以及基因重组技术人工合成生物活性肽
1.2 生物活性肽的功能
1.2.1 调节胃肠道吸收矿物质和营养物质的功能
1.2.2 调节神经系统
1.2.3 调节心血管系统
1.2.4 调节免疫系统
1.2.5 调节机体的抗氧化功能
1.2.6 其他功能
1.3 生物活性肽在水产养殖中的研究进展应用
1.3.1 多肽在水产养殖中的研究进展
1.3.2 动物蛋白源活性肽在水产动物中的研究
2 猪血的研究进展
2.1 猪血的成分
2.2 猪血的开发和利用
2.2.1 在饲料上的利用
2.2.2 食品工业应用
2.2.3 在保健食品中的利用
2.2.4 制取多肽
3 鱼类细胞培养
3.1 鱼类细胞培养研究进展
3.2 细胞培养的形式
3.3 影响鱼类细胞培养的因素
3.3.1 温度
3.3.2 PH值和渗透压
3.3.3 培养基
3.3.4 添加成分
4 Toll样受体在水产动物免疫中的研究进展
5 实验目的和意义
第二章 猪血多肽的安全性评价分析
1 材料和方法
1.1 试验材料
1.2 实验设计
1.2.1 建鲤头肾细胞分离
1.2.2 猪血多肽体外安全性分析
1.2.3 猪血多肽体内安全性分析
1.3 数据统计
2 结果与分析
2.1 猪血多肽对建鲤头肾细胞活力的影响
2.2 猪血多肽体内安全性测定
3 讨论
第三章 猪血多肽对建鲤离体培养免疫细胞活性的影响
1 材料和方法
1.1 材料
1.1.1 实验用鱼
1.1.2 试剂和仪器
1.2 方法
1.2.1 建鲤外周血白细胞分离
1.2.2 建鲤头肾巨噬细胞的分离
1.2.3 建鲤头肾细胞的分离
1.3 免疫指标的测定
1.3.1 外周血白细胞增殖的测定
1.3.2 呼吸爆发活性测定
1.3.3 SOD活力的检测
1.4 数据分析
2 结果与分析
2.1 猪血多肽对建鲤外周血白细胞增殖的影响
2.2 猪血蛋白活性肽对建鲤头肾巨噬细胞氮呼吸爆发和氧呼吸爆发活性的影响
2.3 猪血多肽对建鲤离体头肾细胞SOD活性的影响
3 讨论
第四章 猪血多肽对鲤血清中免疫因子的影响
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 实验用鱼
1.1.2 试剂和仪器
1.2 方法
1.2.1 试验组别划分及处理
1.2.2 样品采集
1.2.3 免疫指标的测定
1.3 数据分析
2 结果与分析
2.1 猪血多肽对建鲤血清中IL-1β和TNF-α的影响
2.2 猪血多肽对建鲤血清中C3和C4的影响
2.3 猪血多肽对建鲤肝脏细胞TLR-4含量变化的影响
3 讨论
第五章 猪血多肽对建鲤抗氧化能力的影响
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 实验用鱼
1.1.2 试剂和仪器
1.2 方法
1.2.1 试验组别划分及处理
1.2.2 血清制备
1.2.3 血清蛋白含量以及生化指标活力测定
1.3 数据分析
2 结果与分析
2.1 猪血多肽对建鲤血清中TP和Alb含量的影响
2.2 猪血蛋白活性肽对建鲤血清中抗氧化能力的影响
2.3 猪血多肽对建鲤血清中AKP活性的影响
3 讨论
结论
参考文献
致谢
攻读学位期间发表的论文
附录
本文编号：3824275
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