TiO 2 NPs处理对家蚕丝蛋白合成相关信号通路的影响
发布时间：2024-04-24 22:19
家蚕(Bombyx mori)是鳞翅目的重要经济昆虫,驯养历史已有8500余年。蚕丝业是中国的传统产业,我国生丝产量占世界生丝总产量的78%以上,是全球丝绸原料的重要原产地。增加蚕丝的产量,提高蚕丝的品质是发展蚕丝业的的核心问题,如何进一步提高家蚕生丝是蚕丝产业发展的面对的主要问题,运用分子生物学的手段提高蚕丝的产量是目前提高蚕丝产量新手段。近来的研究主要围绕家蚕丝蛋白编码基因、转录因子间的相互作用和丝蛋白基因的组织特异性表达,家蚕丝蛋白合成的信号调节机制还没有解明。随着时代的进步和科技的发展,纳米生物技术的发展取得了长足的进步,在众多领域获得的了重大的成果。纳米型饲料添加剂在畜牧业生产中被广泛应用,效果显著。纳米二氧化钛(TiO2 NPs)是一种典型的纳米材料,因其表面效应、体积效应、量子尺寸效应和宏观量子隧道效应等特点,被广泛的应用于生物学领域。TiO2 NPs的生物学效应与其浓度相关,高浓度的TiO2 NPs对生物有毒害作用,低浓度的TiO2 NPs作为添加剂使用可促进牲畜的生长及蛋白的合成。...
【文章页数】：78 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
中文摘要
abstract
前言
1.研究背景
2.研究目的
3.研究方法
4.研究意义
5.预期结果
附：技术路线
第一章 文献综述
第一节 家蚕丝蛋白的研究进展
1.家蚕丝腺的结构和功能
2.丝蛋白的研究现状
3.TiO2 NPs对家蚕丝蛋白合成的影响
第二节 PI3K/AKT信号通路的研究进展
1.PI3K/AKT信号通路的概述
2.家蚕PI3K/AKT信号通路的相关研究
第三节 总结与展望
第二章 家蚕后部丝腺差异表达基因分析
第一节 前言
第二节 材料与方法
1.实验昆虫
2.TiO2 NPs的制备及添食
3.家蚕饲养及取材
4.总RNA抽提
5.RNA纯化
6.反转录
7.内参基因检验cDNA质量
8.Digital gene expression(DGE)测序
9.引物设计
10.实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测mRNA表达
第三节 实验结果
1.DGE文库的整体分析
2.标签映射的分析
3.差异表达基因的鉴定
4.Gene Ontology功能显著性富集和KEGGPathway显著性富集分析
5.QRT-PCR验证差异表达的基因
第四节 讨论
第五节 小结
第三章 TiO2 NPs对家蚕丝腺AKT/TOR信号通路的影响
第一节 前言
第二节 材料与方法
1.实验昆虫
2.TiO2 NPs的制备及添食
3.家蚕饲养及取材
4.总RNA抽提
5.RNA纯化
6.反转录
7.内参基因检验cDNA质量
8.引物设计
9.qRT-PCR检测mRNA表达
10.Westernblot检测蛋白表达
第三节 实验结果
1.外源物质处理对Akt/Tor信号通路相关基因的mRNA表达的影响
2.外源物质对Akt/Tor信号通路蛋白表达水平的影响
3.Akt/Tor信号通路对丝蛋白基因表达的影响
第四节 讨论
第五节 小结
第四章 丝蛋白合成转录因子对丝蛋白合成的调控
第一节 前言
第二节 材料与方法
1.实验昆虫
2.TiO2 NPs的制备及添食
3.家蚕饲养及取材
4.总RNA抽提
5.RNA纯化
6.反转录
7.内参基因检验cDNA质量
8.引物设计
9.qRT-PCR检测mRNA表达
10.Westernblot检测蛋白表达
11.丝腺中总蛋白含量的测定
第三节 实验结果
1.LY294002处理对家蚕丝蛋白相关基因的影响
2.雷帕霉素处理对家蚕丝蛋白相关基因的影响
3.LY294002和雷帕霉素处理对家蚕丝蛋白相关蛋白的影响
4.LY294002和雷帕霉素处理对家蚕后部丝腺蛋白含量的影响
第四节 讨论
第五节 小结
总结
参考文献
攻读学位期间公开发表的论文
致谢
本文编号：3963583
【文章页数】：78 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
中文摘要
abstract
前言
1.研究背景
2.研究目的
3.研究方法
4.研究意义
5.预期结果
附：技术路线
第一章 文献综述
第一节 家蚕丝蛋白的研究进展
1.家蚕丝腺的结构和功能
2.丝蛋白的研究现状
3.TiO2 NPs对家蚕丝蛋白合成的影响
第二节 PI3K/AKT信号通路的研究进展
1.PI3K/AKT信号通路的概述
2.家蚕PI3K/AKT信号通路的相关研究
第三节 总结与展望
第二章 家蚕后部丝腺差异表达基因分析
第一节 前言
第二节 材料与方法
1.实验昆虫
2.TiO2 NPs的制备及添食
3.家蚕饲养及取材
4.总RNA抽提
5.RNA纯化
6.反转录
7.内参基因检验cDNA质量
8.Digital gene expression(DGE)测序
9.引物设计
10.实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测mRNA表达
第三节 实验结果
1.DGE文库的整体分析
2.标签映射的分析
3.差异表达基因的鉴定
4.Gene Ontology功能显著性富集和KEGGPathway显著性富集分析
5.QRT-PCR验证差异表达的基因
第四节 讨论
第五节 小结
第三章 TiO2 NPs对家蚕丝腺AKT/TOR信号通路的影响
第一节 前言
第二节 材料与方法
1.实验昆虫
2.TiO2 NPs的制备及添食
3.家蚕饲养及取材
4.总RNA抽提
5.RNA纯化
6.反转录
7.内参基因检验cDNA质量
8.引物设计
9.qRT-PCR检测mRNA表达
10.Westernblot检测蛋白表达
第三节 实验结果
1.外源物质处理对Akt/Tor信号通路相关基因的mRNA表达的影响
2.外源物质对Akt/Tor信号通路蛋白表达水平的影响
3.Akt/Tor信号通路对丝蛋白基因表达的影响
第四节 讨论
第五节 小结
第四章 丝蛋白合成转录因子对丝蛋白合成的调控
第一节 前言
第二节 材料与方法
1.实验昆虫
2.TiO2 NPs的制备及添食
3.家蚕饲养及取材
4.总RNA抽提
5.RNA纯化
6.反转录
7.内参基因检验cDNA质量
8.引物设计
9.qRT-PCR检测mRNA表达
10.Westernblot检测蛋白表达
11.丝腺中总蛋白含量的测定
第三节 实验结果
1.LY294002处理对家蚕丝蛋白相关基因的影响
2.雷帕霉素处理对家蚕丝蛋白相关基因的影响
3.LY294002和雷帕霉素处理对家蚕丝蛋白相关蛋白的影响
4.LY294002和雷帕霉素处理对家蚕后部丝腺蛋白含量的影响
第四节 讨论
第五节 小结
总结
参考文献
攻读学位期间公开发表的论文
致谢
本文编号：3963583
本文链接：https://www.wllwen.com/nykjlw/dzwbhlw/3963583.html