美国白蛾几丁质脱乙酰酶HcCDAs的生化特性分析及功能研究

发布时间:2024-03-06 21:45
  美国白蛾Hyphantria cunea(Drury),属鳞翅目(Lepidoptera)、灯蛾科(Arctiidae)、白蛾属(Hyphantria),是一种重要的入侵害虫,对我国森林资源和农林业生产造成重大危害。几丁质脱乙酰酶(Chitin deacetylase,CDA)属糖酯酶4家族,是一种几丁质胞外修饰酶,参与昆虫体内几丁质代谢。本研究以美国白蛾为研究对象,分析几丁质脱乙酰酶的生化特性和生物学功能,为开发新型生防靶标提供理论依据。具体研究结果如下:1.利用RACE-PCR技术,结合美国白蛾中肠转录组数据库,分离克隆了hccda1(KF975504)、hccda2a(KT781841)、hccda2b(KT781842)和hccda4(KX822766)基因。开放阅读框分别为1632 bp、1629 bp、1611 bp和1494 bp,编码543、542、536和497个氨基酸,预测蛋白分子量为62 kDa、61 kDa、61 kDa和56 kDa,等电点为4.75、5.20、5.27和5.11,N-端包含信号肽序列,含有多个N-糖基化位点以及5个保守基序。HcCDA1、Hc...

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【部分图文】:

图1-1RNA干扰作用机制Fig.1-1MechanismofactionofRNAinterference

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图1-1RNA干扰作用机制Fig.1-1MechanismofactionofRNAinterference.2.2昆虫dsRNA的导入方法目前,将dsRNA导入昆虫体内主要包括注射、浸泡和饲喂三种方法。其中,注射法是为常用的导入方法,该方法精确度高、干....


图1-2免疫荧光技术的操作流程

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美国白蛾几丁质脱乙酰酶HcCDAs的生化特性分析及功能研究roticavirgiferavirgiferaLeconte)自身基因的dsRNA在抗虫作物中表达,取得良好0]。目前,RNAi技术在实验室操作已经很成熟,在田间应用的可行性还有待进一免疫荧光技术疫荧光技....


图2-1hcactin基因的PCR扩增Fig.2-1PCRamplificationofhcactingene

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美国白蛾几丁质脱乙酰酶HcCDAs的生化特性分析及功能研究结果与分析1hcactin基因的克隆与原核表达.1hcactin基因的克隆以合成的cDNA第一链为模板,设计引物进行PCR扩增,得到大小约为600bp的hca段(图2-1-A),测序,NCB....


图2-2hcactin基因核苷酸序列及推测的氨基酸序列

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22图2-2hcactin基因核苷酸序列及推测的氨基酸序列Fig.2-2Nucleotidesequenceanddeducedaminoacidsequenceofhcactingene起始密码子ATG和终止密码子TAA分别用“=”标示,肌动蛋....



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