一、南方根结线虫非毒性、毒性种群特异效应子的筛选及功能鉴定二、植物内生真菌交枝顶孢Clock-controlled Pr

发布时间:2024-02-20 00:32
  根结线虫(Root-knotnematodes,RKNs)是一种重要的植物寄生线虫,能够侵染5500多种植物,给农业生产造成了严重的经济损失。利用寄主抗性、生防真菌是防治南方根结线虫经济有效的途径。在世界范围内,能够克服抗线虫基因(Mi-,Me3)的南方根结线虫毒性种群在许多作物种植地都有发现,效应子在植物寄生性线虫与寄主的分子互作中起着关键作用。在自然条件下R基因的持久性与非毒性效应子的产生、变异及丢失紧密相关,鉴定根结线虫效应子,揭示其对寄主免疫抑制机理、致病机制,对于发现新的杀线虫药物靶标及抗性基因的持久利用具有重要意义。本研究包括两部分:第一部分以南方根结线虫为研究对象,筛选和鉴定非毒性、Me3毒性种群特异的效应子;第二部分研究以植物内生菌交枝顶孢为研究对象,揭示其对南方根结线虫的生防机制。研究结果如下:南方根结线虫非毒性群体、Me3毒性群体特异效应子的筛选及功能鉴定1.对南方根结线虫非毒性群体(Avir)、Me3毒性种群(Vir)进行转录组测序,通过比较两个近等基因系的转录组,共发现1863个差异表达基因,其中Avir中1330个、Vir中533个;利用SignalP v4....

【文章页数】:113 页

【学位级别】:博士

【部分图文】:

图2.1?pGR107表达载体构建示意图??Fig.?2.1?Schematic?diagram?of?pGR107?vector??

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ASY-Minc03867质粒,回收目的基因酶切片段;C/a?I-Sa/I酶切pGR1回收线性载体片段;T4?DNA连接酶连接(体系如下表),16°C连接过转化入大肠杆菌ToplO感受态细胞,涂布到含有卡那霉素的LB平板上,培养16h;挑取克隆,PCR和测序鉴定获得阳性克隆,构建....


图2.2?pEDV表达载体构建示意图??

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图2.2?pEDV表达载体构建示意图??Fig.?2.2?Schematic?diagram?of?pEDV?vector??2.2.11.2谷枯菌注射??(1)谷枯菌感受态细胞参考农杆菌感受态细胞制作方法,将上述构建好的载体??电击转化入谷枯菌,涂布到含有庆大霉素(5〇ng/m....


图2.3?pTV-Minc03867沉默载体示意图??Fig.?2.3?Schematic?diagram?of?pTV-Minc03867?vector??

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图2.4pSUC2-Minc03867表达载体示意图??Fig.?2.4?Schematic?diagram?of?pSUC2-Minc03867?vector??

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?Minc03867?—?p??图2.3?pTV-Minc03867沉默载体示意图??Fig.?2.3?Schematic?diagram?of?pTV-Minc03867?vector??2.2.12.2农杆菌转化??采用电击转化的方法,将构建正确的基因沉默载体转化至农杆菌GV....



本文编号:3903564

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