红肉脐橙（Citrus sinenesis Osbeck）果实生长发育过程中类胡萝卜素生物合成基因表达的原位检测

发布时间：2024-03-23 10:42

　　柑橘是富含类胡萝卜素的水果,大多情况下果皮含量多于果肉。近年来以柑橘红肉突变体为对象的研究引起了越来越广泛的关注,这些突变体一方面赋予本身优良的外观,另一方面为柑橘果实芽变发生的机理研究以及柑橘果肉中的类胡萝卜素生物合成的研究提供了理想的材料。本研究以红肉脐橙(C.sinensis Osbeckcv ’Cara Cara’)和清家脐橙(C.sinensis Osbeck cv ’Seika’)为实验材料,利用RNA原位杂交技术分析了果实不同组织中类胡萝卜素生物合成相关基因的表达。主要研究结果如下: 1.通过对汁胞进行徒手切片和压片的显微观察,在红肉脐橙汁胞中检测到了红色线状有色体的存在。在番茄和红色葡萄柚中发现了类似的情形,随着果实发育的进行这种形状的有色体在红肉脐橙汁胞中有积累的趋势。 2.将不同发育时期的红肉脐橙和清家脐橙果实样品制成石蜡切片,利用特异性的cRNA探针进行原位杂交,结果表明:psy、pds、lcyb在红肉脐橙和清家脐橙黄皮层中均有表达;mRNA多积累在接近皮层的表层细胞内,在油胞及其周边组织细胞中未能检测到mRNA的积累;不同果实发育期mRNA的积累存在差异;白皮层...

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【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图2一1高等植物类胡萝卜素生物合成途径中的主要酶及其基因(Fraser等，2009)

Gantt1995)，最早由Porter和Lineoln(1950)提出，柑橘类胡萝卜素生物合成途径同所有高等植物一样，均以MEP途径形成的5碳的异戊二烯焦磷酸(正P)为前体，如图2一1示，首先，异戊烯焦磷酸在IPP异构酶(IPPI)和垅儿基垅牛儿基焦磷酸合成酶(GGPS)作用下....

图4一1柑橘汁胞的形态观察(D红肉脐橙汁胞的徒手切片观察(11)

柑橘汁胞是由薄壁细胞组成的胞体和胞柄以及液泡化的空腔组成的细胞，与清家脐橙相比，红肉脐橙汁胞呈红色表型，这种表型主要体现在汁胞胞体和汁柄处，而汁液中仍呈现与清家脐橙类似的橙色(图4一11)，我们分别对160DAF和220DAF的红肉脐橙和清家脐橙汁胞进行压片观察发现，红肉脐橙汁胞....

图4--2红肉脐橙和清家脐橙汁胞中质体的压片观察Fig.4一2Plastidobservationof’CaraCara，and’Se业a.navelorangejuicesaewithsquashPreParation

图4--2红肉脐橙和清家脐橙汁胞中质体的压片观察Fig.4一2Plastidobservationof’CaraCara，and’Se业a.navelorangejuicesaewithsquashPreParation一B:190DAF，220DAF红肉脐橙汁胞;C:F从固定液....

图4一4纽荷尔脐橙和红肉脐橙果实中RNA的提取

4.2.1RNA提取本实验室从纽荷尔脐橙、红肉脐橙黄皮层、白皮层、囊衣、汁胞中分别提取RNA，其质量如图4一4示。将mRNA反转录为cDNA第一链后，直接以cDNA为模板PCR扩增目的基因。图4一4纽荷尔脐橙和红肉脐橙果实中RNA的提取Fig.4一4RNAIsolati....

本文编号：3935804