MiR-342-3p靶向沉默CAP4基因增强肺癌细胞对吉非替尼的耐药性

发布时间：2024-04-16 21:10

　　目的:分子靶向治疗由于其安全性和有效性等特点,已被应用在包括非小细胞肺癌(Non small cell lung cancer,NSCLC)在内的多种肿瘤的临床治疗中。吉非替尼是第一个获批上市的表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂,临床应用取得了较好的疗效,已成为EGFR基因突变的晚期NSCLC患者的一线治疗方案。但是多数患者会在接受吉非替尼治疗一段时间后出现耐药的现象。MicroRNA能够通过沉默其靶基因参与几乎所有的生理或病理性生物学功能的调控。近期的研究发现,多种microRNAs参与了NSCLC中吉非替尼耐药性的形成和维持。本研究拟构建NSCLC吉非替尼耐药的microRNA-靶点调控网络。并明确miR-342-3p在NSCLC细胞对吉非替尼耐药性的形成和调节中的作用以及相关的分子机制,从而为阐明NSCLC的分子靶向治疗耐药的机制提供新依据。方法:1.整合分析NSCLC表达谱的数据集,鉴定差异表达基因。2.对差异表达基因进行GO功能注释及KEGG富集分析。3.构建NSCLC吉非替尼耐药的microRNA-靶点调控网络。4.A549和PC9以及吉非替尼耐药的A549/GR和PC9/G...

【文章页数】：60 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
英文缩略语
第一部分 :综合网络分析法鉴定非小细胞肺癌潜在的与吉非替尼耐药性相关的micro RNAS及其靶点
    1 前言
    2 材料和方法
        2.1 研究对象
        2.2 生物信息学分析方法
            2.2.1 差异表达基因(differentially expressed gene,DEG)的鉴定
            2.2.2 功能及富集分析
            2.2.3 Micro RNA-靶点调控网络的构建
    3 结果
        3.1 吉非替尼耐药的NSCLC中上调的差异表达基因的鉴定及功能研究
        3.2 MICRORNA-靶点调控网络的构建
    4 讨论
    5 结论
第二部分 :MIR-342-3P靶向沉默CAP4 基因增强肺癌细胞对吉非替尼的耐药性
    1 前言
    2 材料和方法
        2.1 实验材料
            2.1.1 实验用细胞株
            2.1.2 主要试剂
            2.1.3 主要实验仪器
            2.1.4 生物信息学和计算机分析软件包
            2.1.5 常见试剂配制
        2.2 实验方法
            2.2.1 细胞培养
            2.2.2 建立NSCLC吉非替尼耐药细胞株
            2.2.3 实时定量PCR
            2.2.4 细胞转染及实验分组
            2.2.5 药物敏感性实验
            2.2.6 双荧光素酶报告基因实验
            2.2.7 Western Blotting
        2.3 实验统计方法
    3 结果
        3.1 MIR-342-3P促进A549/GR和 PC9/GR细胞对吉非替尼的耐药性
        3.2 CPA4在NSCLC细胞中是MIR-342-3P的一个靶基因
        3.3 MIR-342-3P通过沉默CPA4 提高A549/GR和 PC9/GR细胞对吉非替尼的耐药性
    4 讨论
    5 结论
本论文创新性的自我评价
参考文献
综述
    参考文献
攻读学位期间取得的研究成果
致谢
个人简历



本文编号：3956690