基于无花果酶增强的过氧化物模拟酶活性在生物检测中的分析应用

发布时间：2024-03-14 06:11

　　酶是一类由蛋白质和RNA组成的生物催化剂,具有高催化效率和高特异性的特点,在新陈代谢、营养和能量转换等生物过程中起主导作用。过氧化物酶,如辣根过氧化物酶(HRP),是一类由微生物或植物产生的氧化还原酶,可通过过氧化氢作为电子受体催化过氧化物酶底物的氧化。天然过氧化物酶的特异性好、催化效率高,已广泛应用于许多生化分析中。但由于其生产成本太高、不易保存、对酸碱和高温的耐受性不好,很大程度上制约了其实际应用。近年来,人工过氧化物酶由于可以长期储存,成本低和在极端条件下的耐受性好而备受关注,被认为是天然过氧化物酶的替代品。但有些非生物过氧化物模拟酶通常需要复杂的制备和修饰过程,并且其活性之间存在批次间差异。因此,非常需要开发基于天然酶的人造过氧化物模拟酶。无花果酶是一种天然的巯基蛋白酶,同时还具有过氧化物模拟酶活性。但是无花果酶的过氧化物酶活性相对较低,这在某些方面限制了它的应用。在本文中,为了增强无花果酶的过氧化物模拟酶活性,将其封装在介孔金属有机框架中形成ficin@PCN-333(Fe)复合物,或用N-乙基马来酰亚胺(NEM)和三(2-羧乙基)膦盐酸盐(TCEP)合理封闭无花果酶的巯基合...

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【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图1.1Cu3(PO4)2·3H2O杂化纳米花的形成过程及其应[16]

西南大学硕士学位论文2二铵盐（ABTS）的氧化。Yang等[16]用硫酸铜水溶液（CuSO4）和牛血清白蛋白（BSA）为原料合成了具有过氧化物模拟酶活性的Cu3(PO4)2·3H2O杂化纳米花，其在过氧化氢的存在下能够催化乙酰丙酮（ACAC）的氧化生成乙酰丙酮自由基（图1.1）。....

图1.2荧光素催化TMB氧化生成oxTMB的示意图[22]

西南大学硕士学位论文2二铵盐（ABTS）的氧化。Yang等[16]用硫酸铜水溶液（CuSO4）和牛血清白蛋白（BSA）为原料合成了具有过氧化物模拟酶活性的Cu3(PO4)2·3H2O杂化纳米花，其在过氧化氢的存在下能够催化乙酰丙酮（ACAC）的氧化生成乙酰丙酮自由基（图1.1）。....

图1.3NB-rGO具有增强的过氧化物酶活性[29]

媚擅撞牧系拇呋?钚栽銮俊?ee等人[29]将氮和硼共同掺杂在还原氧化石墨烯（rGO）中形成NB-rGO，由于氮和硼的掺入改变了rGO的化学环境，使得NB-rGO的催化效率和单独的rGO相比提高了近1000倍（图1.3）。另外，Dai课题组[30]通过溶剂热法合成了尺寸低于100n....

图1.4肝素增强AuCNs的过氧化物酶活性的示意图[31]

西南大学硕士学位论文41.2.2通过底物与载体或化学修饰剂的作用载体或化学修饰剂通过一些化学作用，如静电作用，可以使酶的活性位点周围聚集更多的催化底物，从而提高酶与底物的亲和能力，增强其催化活性。基于此原理，Fu课题组[31]报道了肝素能有效增强用BSA稳定的AuCNs的过氧化物....

本文编号：3928179