恶臭假单胞菌株S16尼古丁降解关键蛋白的结构生物学研究

发布时间：2024-03-19 22:30

　　尼古丁是一种吡啶类生物碱，能够非常容易的穿过生物膜和血脑屏障，并可作用于人类的神经系统，严重威胁人类的健康；同时在加工烟草的过程中也会伴随着产生高浓度的尼古丁废弃物，对环境造成严重污染。因此寻找切实可行的途径降低烟草和环境废弃物中的尼古丁含量，对维护人类健康和生态安全有着深远的意义。 恶臭假单胞菌（Pseudomonas putida S16）是本课题组前期筛选的一株能高效降解尼古丁的微生物。目前对其代谢降解尼古丁的途径已经确定为吡咯途径。该降解途径有多种酶的参与。 HspB催化6-羟基-3-琥珀酰吡啶(6-hydroxy-3-succinoyl-pyridine，HSP)到2，5-二羟基吡啶(2，5-dihydroxy-pyridine，DHP)，是尼古丁吡咯降解途径中的关键酶之一。本研究对HspB进行了表达、纯化和结晶，成功获得可培养HspB晶体的条件。 NicR是S16菌株降解尼古丁途径中的转录调控因子。NicR属于TetR家族，是一种最常见的原核转录调控因子。本研究对NicR全长蛋白进行了表达、纯化和结晶，并对其进行了晶体的优化和X射线衍射。通过同源序列比对后，截去NicR中的...

【文章页数】：94 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图1-1尼古丁结构式

[2]。图1-1尼古丁结构式Fig.1-1StructuralFormulaofnicotine尼古丁是导致人类烟瘾的罪魁祸首。烟草在燃吸的过程中产生的大量尼古丁会直接进入肺循环，能在10-20s内穿过血脑屏障进入大脑，并最终作用于人类的神经系统[3,4]。长期....

图1-2假单胞菌株S16尼古丁代谢途径（A）恶臭假单胞菌株S16降解尼古丁的途径（B）

4图1-2假单胞菌株S16尼古丁代谢途径（A）恶臭假单胞菌株S16降解尼古丁的途径（B）HspB催化的反应Fig.1-2Pathwayforthemetabolismofnicotine(A)Pathwayforthemetabolismofnicot....

图1-3四环素抗性阻遏蛋白的转录调控示意图

图1-3四环素抗性阻遏蛋白的转录调控示意图[32]Fig.1-3Transcriptionalregulationoftetracyclineresistancerepressorprotein[32]1.2蛋白质结构生物学简介1.2.1蛋白质及其组成氨基酸....

图2-1PCR反应程序Figure2-1ProgramofPCR

图2-1PCR反应程序Figure2-1ProgramofPCR2.4.1.3PCR扩增产物回收PCR产物用1%的琼脂糖凝胶电泳回收。先在PCR产物中加入10×已加入核酸染料的上样缓冲液，混匀后再上样于琼脂糖凝胶孔中，110V电压，电泳20-30min....

本文编号：3932636