miR-25抑制剂对肺腺癌细胞A549/DDP作用的初步研究

发布时间：2024-03-16 13:10

　　目的研究mi R-25抑制剂对耐顺铂A549/DDP细胞增殖、凋亡和顺铂耐药性的影响及可能机制的探讨。方法培养人肺腺癌A549及耐顺铂A549/DDP细胞株,检测顺铂对两个细胞株的半数耐药浓度(IC50);转染mi R-25抑制剂至A549/DDP细胞内,提取细胞总RNA,并以q PCR法评估mi R-25抑制剂的转染效果;抑制剂转染A549/DDP细胞后,以CCK8法分别在转染24 h、48 h、72 h时测定转染组、阴性对照组及无处理组细胞的增殖抑制率,并以流式细胞仪检测转染mi R-25抑制剂72 h后三组细胞的凋亡率;设置转染抑制剂组及阴性对照组,以CCK8法检测顺铂作用于两组细胞的IC50;以细胞爬片免疫细胞化学及数字化病理扫描系统分析PTEN蛋白在转染抑制剂前后的表达情况。结果 A549细胞株的IC50为0.591μg/ml,95%可信区间为0.436⁰.753μg/ml;A549/DDP细胞的IC50为9.040μg/ml,95%可信区间6.504¹4.783μg/ml,A549/DDP的IC50约为A549的15.29倍;与阴...

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【文章目录】：
材料与方法
    一、材料与试剂
    二、方法
        1. 细胞培养:
        2. CCK8检测:
        3. mi R-25-I转染及转染效果检测:
        4. mi R-25-I增殖抑制试验及细胞凋亡检测:
        5. 顺铂联合miR-25-I增殖抑制试验:
        6. 细胞爬片免疫细胞化学:
    三、统计学分析
结果
    一、CCK8检测
    二、mi R-25-I转染效果的检测
    三、mi R-25-I对A549/DDP的增殖抑制实验及凋亡率检测
    四、顺铂与mi R-25-I联合增殖抑制试验
    五、细胞爬片免疫细胞化学
讨论



本文编号：3929663