已糖激酶结构域1对胃癌的作用及临床意义

发布时间：2024-03-08 21:38

　　研究背景:胃癌是全世界最常见的恶性肿瘤之一,在中国胃癌发病率和死亡率都高居肿瘤排行榜前列。目前胃癌的治疗方法主要是早期手术治疗,晚期化疗,由于早期胃癌症状隐匿而且中国没有普及胃癌筛查项目,因此大多数患者被确诊时已进展为中晚期,失去了手术治疗的指征。临床研究显示,不同化疗方案下的中晚期胃癌患者总体生存时间到了平台阶段,中位数徘徊在9到11个月,而现有的已通过临床试验进入临床的胃癌靶向药种类有限,疗效不明显,联合了分子靶向药的化疗方案没有对患者生存时间和生活质量有显著提升的作用,因此有研究新的作用靶点的需要。作为肿瘤特有的代谢方式,有氧性糖酵解,即Warburg效应,广泛存在于各种类型的肿瘤,因此具有成为新的作用靶点的可能。糖酵解中的关键酶之一,己糖激酶1(HK-Ⅰ)和HK-Ⅱ(HK2)已被发现在多种肿瘤中高表达,它们不仅能调高肿瘤的糖酵解水平,还具有非酶活性,能抑制细胞凋亡和调控细胞自噬,对细胞的恶性生物学有促进作用,被认为是潜在的作用靶点。己糖激酶类最晚被发现的己糖激酶结构域1(HKDC1)同样具有类似的结构,因此推测具有类似的功能,但相关研究极少,因此本文将探索其与胃癌的关系。目的:...

【文章页数】：78 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

图２－３Ｋａｐｌａｎ－ＭｅｉｓｅｒＰｌｏｔｔｉｎｇ数据库获取胃癌数据绘制的ＨＫＤＣ１生存曲线（Ａ）和ＧＥＯ??

ＨＫＤＣ１表达差异明显的Ｏｏｉ胃癌芯片（ＧＳＥ１５４５９）的生存数据，易彳除删失的??数据以后，共计有１９２个患者的ＨＫＤＣ１表达度及生存时间，绘制ＩＣａｐｌａｎ－Ｍｅｉｓｅｒ??曲线图（图２－３），ＨＫＤＣ１高表达患者总体生存时间也同样显著短于ＨＫＤＣ１??低表达患者（ｌｏｇ－....

图３－１五种胃癌细胞系勻人类正常Ｐｉ１粘膜丨？．皮细胞系ＧＥＳ－丨中ＨＫＤＣ１?／丨：ｍＲＮＡ与蚩白??

水平和蛋白质水平ＨＫＤＣ１的表达情况。结果均显示，ＧＥＳ－１的ＨＫＤＣ１表达??度极低，而人类胃癌细胞系中ＭＫＮ４５细胞的ＨＫＤＣ１表达度最高，其余几种??胃癌细胞系均有不同程度的ＨＫＤＣ１表达（图３－丨、３－２）。因此选取ＭＫＮ４５??细胞作为研究ＨＫＤＣ１在胃癌细胞中的致癌功....

图３－２五种胃癌细胞系与人类正常胃粘膜上皮细胞系ＧＥＳ－１的蛋白免疫印迹条带

水平和蛋白质水平ＨＫＤＣ１的表达情况。结果均显示，ＧＥＳ－１的ＨＫＤＣ１表达??度极低，而人类胃癌细胞系中ＭＫＮ４５细胞的ＨＫＤＣ１表达度最高，其余几种??胃癌细胞系均有不同程度的ＨＫＤＣ１表达（图３－丨、３－２）。因此选取ＭＫＮ４５??细胞作为研究ＨＫＤＣ１在胃癌细胞中的致癌功....

图３－３同一视野倒置荧光显微镜４００ｘ下明场（Ａ）和蓝光激发（Ｂ）的细胞

首先使用带绿色荧光的ＦＡＭ转染阴性对照ｓｉＲＮＡ摸索转染浓度，转染６??小时后在荧光倒置显微镜的蓝色荧光下观察荧光和明场下的细胞数，结果如下??图，经过对比显示转染效率接近１００％?（图３－３）。然后用免疫蛋白印迹检测用??ｓｉＨＫＤＣｌ沉默ＨＫＤＣ１以后的沉默效率，结果表明相比....

本文编号：3922422