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GP73通过调控Rab23影响肝癌细胞自噬的分子机制研究

发布时间:2024-02-27 04:44
  目的:我们前期通过分析我们发现GP73具有TBC样GAP基序。在此基础上探讨GP73是否具有的GAP酶活性,初步探索GP73与Rab23相互作用的分子机制,进一步研究GP73是否通过其GAP酶活性影响Rab23的水解,从而揭示GP73的GAP酶活性的主要生物学功能,为GP73临床应用研究以及临床治疗研究提供理论基础。方法:1、通过Western blot、Co-IP实验技术,筛选出与GP73有相互作用的Rab蛋白。2、通过基因重组技术构建GP73TBC结构样突变体载体,确认其在真核细胞中表达。3、通过GAP水解酶实验和GTP活性测定实验,研究GP73的及其突变体对Rab23的水解作用。4.通过Western blot实验方法、细胞荧光免疫共聚焦实验的方法研究GP73和GP73的Rab-GAPs突变体对自噬的影响。结果:1、通过对15种Rab家族分子的筛选,发现GP73与Rab23有相互作用。2、通过基序分析,发现GP73具有非常保守的TBC样GAP酶基序。突变GP73氨基酸序列第248位和310位氨基酸,构建GP73GAPs酶突变体,突变体GP73(R248K)和GP73(Q310A)...

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1 前言
2 材料与仪器
3 实验方法
4 结果
5 讨论
6 结论
参考文献
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    参考文献
致谢
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