探索miR-17调控Balb/c小鼠乳腺癌生长和转移的实验研究

发布时间：2024-02-27 02:05

　　乳腺癌(breast cancer)是乳房组织的恶性肿瘤,其病程进展快,病灶易发生转移,而转移灶引起的并发症为其致死的主因。我国每年约有20万例新增患者,其发病率与死亡率逐年上升,尽管乳腺癌通过手术治疗、化疗、放疗及内分泌和分子靶向治疗等手段有效地治愈了临床原位癌,但对于已发生远处转移乳腺癌患者的总体治疗效果及预后仍然欠佳,乳腺癌细胞可经血液或淋巴道途径发生肺、胸膜、骨、肝及脑转移等,患者发生远处器官转移是其致死的主要原因之一。大量研究表明,miRNA对于乳腺癌的发生、发展和扩散转移具有重要调节作用,深入研究乳腺癌发生发展的分子机制,是寻找治疗对策的关键。miR-17-92 cluster是目前研究最广泛的miRNA之一,miR-17-92 cluster的功能涉及正常发育、肿瘤发生、免疫疾病、心血管疾病及神经变性疾病等。miR-17-92 cluster位于小鼠14号染色体,人的染色体13q13-q32。它包括6个独立成员:miR-17、miR-18、miR-19a、miR-19b、miR-20a与miR-92a,每个成员的表达作用各不相同,平衡表达。其中miR-17在大量研究中表现...

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【学位级别】：硕士

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中文摘要
Abstract
前言
第1章 文献综述
    1.1 乳腺癌
        1.1.1 乳腺癌及其病因
        1.1.2 乳腺癌模型
        1.1.3 乳腺癌诊断及临床治疗情况
    1.2 micro RNA
        1.2.1 micro RNA与癌症
        1.2.2 miR1792 cluster与癌症
        1.2.3 miR-17与癌症
    1.3 Bcl-2 凋亡途径
        1.3.1 Bcl-2 家族蛋白与凋亡途径
        1.3.2 Bcl-2 蛋白与 miR-17
    1.4 淋巴细胞与多潜能干细胞
        1.4.1 淋巴细胞与癌症
        1.4.2 多潜能造血干细胞与癌症
        1.4.3 淋巴细胞、多潜能干细胞与micro RNA
第2章 实验材料与方法
    2.1 主要实验仪器和材料
        2.1.1 主要试剂及来源
        2.1.2 主要仪器
        2.1.3 主要试剂及溶液配制
    2.2 实验动物及模型制备
        2.2.1 细胞培养及细胞转染
        2.2.2 实验动物及分组
        2.2.3 模型制备
        2.2.4 miR-17上清液给予治疗
    2.3 组织标本的制备及检测
        2.3.1 组织标本的制备
        2.3.2 流式检测脾细胞CD4，CD8，CD19，CD34抗体染色
        2.3.3 脾组织micro RNA提取及q-PCR
        2.3.4 石蜡切片制作
        2.3.5 HE染色
        2.3.6 免疫组化染色
        2.3.7 Western Blot检测Bcl-2，Bax的表达
        2.3.8 图像采集
        2.3.9 统计学处理
第3章 实验结果
    3.1 实验动物基本情况
    3.2 测量实验动物肿瘤生长情况
    3.3 检测脾组织中miR-17的表达
    3.4 小鼠肺部肿瘤转移灶情况
    3.5 miR-17对脾组织的Bcl-2，Bax蛋白的作用
    3.6 miR-17对CD4，CD8 T淋巴细胞、CD19 B淋巴细胞、CD34造血干细胞的影响
    3.7 肿瘤组织CD8抗体染色
第4章 讨论
第5章 结论
参考文献
致谢



本文编号：3912210