磷脂酰肌醇蛋白聚糖-3(GPC-3)对肝细胞癌生长及侵袭的影响

发布时间：2024-01-25 18:24

　　【背景和目的】肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)是最常见的原发性肝癌,占肝癌的90%,有数据表明:HCC由于其发病率逐年增加且预后差现位居世界恶性肿瘤致死病因的第2位。GPC-3是过度生长综合症(Simpson Golabi Behmel Syndrome,SGBS)患者中普遍存在的功能突变基因,是蛋白聚糖家族成员之一。GPC-3基因编码的GPC-3蛋白可通过共受体(co-receptor)与相关配基如生长因子、细胞黏附分子等共同作用,来参与细胞生物学行为的调节。有学者认为在细胞生长的各个过程包括细胞的繁殖、黏附、分化、迁移等过程中均存在GPC-3的直接或间接调控。研究发现HCC患者体内的GPC-3表达水平跟健康人及良性肝疾病患者相比显著升高,正常成人及良性肝疾病患者组织和血清中的GPC-3表达水平极低甚至检测不到,这表明GPC-3与HCC关系密切,可能在其发生发展中起促进作用。GPC-3是HCC临床鉴别诊断中有用的特异性标志物,又是HCC预防和免疫治疗的新靶点,尽管目前有多篇文章探讨其分子机制,它的结构已基本研究清楚,但是其功能尚未完全阐明。基于以上...

【文章页数】：89 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
附录
中文摘要
英文摘要
前言
材料与方法
    1 材料
        1.1 实验所用细胞系
        1.2 主要溶液配制
    2 方法
        2.1 GPC-3过表达载体及阴性载体的构建
        2.2 GPC-3敲除载体的构建
        2.3 GPC-3过表达载体及其阴性对照载体的鉴定
        2.4 GPC-3在多株HCC细胞中表达水平的检测
        2.5 GPC-3过表达稳定细胞株的获得
        2.6 GPC-3敲除稳定细胞株的获得
        2.7 稳定细胞株生物学行为的检测
        2.8 GPC-3敲除稳定细胞株裸鼠皮下成瘤实验
        2.9 统计学处理
结果
    1 GPC-3 过表达慢病毒载体的构建和验证
        1.1 GPC-3过表达慢病毒载体的构建
        1.2 GPC-3过表达慢病毒载体的验证
        1.3 阴性对照载体的构建及验证
    2 GPC-3敲除慢病毒载体的构建和验证
        2.1 GPC-3敲除慢病毒载体的构建
        2.2 GPC-3敲除慢病毒载体测序验证
    3 过表达载体慢病毒的制备和表达
        3.1 过表达载体瞬转入293Ft细胞
        3.2 过表达载体导入293Ft细胞获取慢病毒
    4 GPC-3敲除载体慢病毒的制备和表达
        4.1 GPC-3敲除载体慢病毒的制备和表达
    5 GPC-3过表达/敲除稳定细胞株的获得和验证
        5.1 GPC-3稳定过表达/敲除稳定细胞株的筛选
        5.2 GPC-3稳定过表达/敲除细胞株的验证
    6 GPC-3稳定过表达/敲除细胞株生物学行为的检测
        6.1 GPC-3稳定过表达细胞株生物学行为的检测
        6.2 GPC-3稳定敲除细胞株生物学行为的检测
    7 GPC-3敲除稳定细胞株裸鼠成瘤实验及相关检测
        7.1 GPC-3敲除稳定细胞株裸鼠成瘤实验
        7.2 裸鼠瘤体组织检测
讨论
结论
参考文献
综述
    参考文献
致谢



本文编号：3885328