白果内酯对CPZ诱导的脱髓鞘损害小鼠的神经保护作用及其机制研究

发布时间：2024-04-26 01:44

　　目的本课题应用双环己酮草酰二腙(Cuprizone,CPZ)诱导C57BL/6小鼠建立中枢神经系统(Central nervous system,CNS)脱髓鞘模型,给予白果内酯(Bilobalide,BB)进行干预。观察给药后动物的行为学表现、髓鞘保护、外周免疫调节及抑制小胶质细胞向M1型活化的细胞和分子机制。阐明BB治疗CNS脱髓鞘损害的靶点和途径,为今后应用BB治疗多发性硬化(multiple sclerosis,MS)提供科学的理论依据。方法本实验采用6周龄C57BL/6雄性小鼠,建立CPZ诱导的C57/BL6小鼠脱髓鞘模型。小鼠分为正常组、模型组、BB治疗组,每组8只小鼠,正常组小鼠正常饲料饲育6周,模型组和BB治疗组小鼠用含0.2%CPZ的粉末饲料饲育6周。在喂食后的第四周末(第28天)开始,BB治疗组腹腔注射给予BB,每日给药一次,连续给药至喂食后的第六周末(第42天),同时正常组、模型组每日给予生理盐水腹腔注射,并在给药期间进行行为学检测,并从造模开始记录动物的体重。在第六周结束时处死动物,眼眶取血,取脾脏、脑组织,分离脾脏单个核细胞(mononuclear cells...

【文章页数】：52 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图1.BB治疗CPZ诱导脱髓鞘小鼠的临床和病理学表现（a）CPZ喂养4周后，腹腔注射BB，在持续2周的治疗期间仍用含0.2％CPZ粉末的毒饼干喂养

11图1.BB治疗CPZ诱导脱髓鞘小鼠的临床和病理学表现（a）CPZ喂养4周后，腹腔注射BB，在持续2周的治疗期间仍用含0.2％CPZ粉末的毒垂直木测试和高架十字迷宫测试用于检测小鼠的行为学表现。（b）在CPZ喂养6周后，染色评估脱髓鞘的病理学变....

图2.三组动物脾脏的体积和重量在CPZ喂养的小鼠中，BB恢复了脾脏的体积和重量

模型组胼胝体内着色面积为（9.67±2.13）*102，BB治疗组为（19.86，两组比较，有统计学显著性差异（p＜0.05）。我们进一步利用成熟少突标志物O4+抗体进行免疫荧光染色，与正常小鼠相比，CPZ喂养小鼠的大的表达和O4少突胶质细胞的表达明显减少（图1d....

图3.三组小鼠MOG抗体检测结果

图3.三组小鼠MOG抗体检测结果(a)ELISA测定血清、培养上清液和脑组织匀浆中MOG35-55抗体的浓度。（b和c）通过斑点印检测MOG35-55抗体的浓度和特异性。（d）通过ELISA测量培养上清液中IL-1β、IL-6和TNF-α浓度。（....

图4.三组小鼠IgG和O4+少突胶质细胞染色结果

16图4.三组小鼠IgG和O4+少突胶质细胞染色结果（a）小鼠脑中MBP免疫组织化学染色的计算机绘图。蓝色方块连接b和c中的免疫组织化学位点（b）在正常小鼠脑中，通过使用来自CPZ喂养的小鼠的MOG抗体+血清检测MOGIgG与脑的纹体和腹侧苍白....

本文编号：3964532