群体感应抑制剂筛选及冬凌草甲素对铜绿假单胞菌QSI活性研究

发布时间：2024-03-13 23:23

　　目的细菌感染是时刻困扰着医学临床治疗的主要问题之一,抗生素的滥用导致多重耐药菌问题日益突出。当前,寻找新抑菌途径和研发新型抗菌药是药学发展的重要方向之一。群体感应抑制剂(Quorum sensing inhibitors,QSI)能通过不同途径干预群体感应系统中的自诱导信号分子,达到抑制毒力因子产生与生物膜形成。本研究针对铜绿假单胞菌(Pseudomonas Aeruginosa)的群体感应系统,选择了15种中成药进行筛选,获得具有QSI活性的冬凌草甲素并进行初步探究作用机制。方法紫色杆菌(Chromobacterium violaceum)CV026作为报告菌株,用报告平板和紫色菌素产量分析对15种中成药提取液进行初步筛选,获得潜在的群体感应抑制剂。进一步检验初筛获得的中成药提取液对铜绿假单胞菌PA01的绿脓菌素释放量、鼠李糖酯释放量、水解蛋白酶活性、弹性蛋白酶活性以及生物膜形成的影响。选择冬凌草中主要活性成分——冬凌草甲素,进行进一步的验证,并且用荧光定量PCR检测群体感应相关转录调节因子lasR基因和rhlR基因的表达量变化。结果通过报告菌株CV026初步筛选,冬凌草片醇提液在最...

【文章页数】：70 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图1-1群体感应抑制剂作用途径Fig.1-1ThepathwaysofQuorumsensinginhibitors

广东药科大学硕士研究生学位论文一步启动特定基因并协调表达。QS系统属于一种通讯系统存在于细菌与细菌间，并由细菌群体内生长密度激活的调控系统。细菌可通过QS系统利用AHLs调控下游靶基因达到种群环境生存适应性调节[33,34]。在1.3中所提到的群体感应系统分类中，不....

图1-2群体感应系统对铜绿假单胞菌生物膜与毒素的影响

6图1-2群体感应系统对铜绿假单胞菌生物膜与毒素的影响Fig.1-2TheinfluencesofQuorumsensingtobiofilmandvirulencefactorsinPseudomonasaeruginosa1.6群体感应抑制剂国内....

图2-1报告平板法检测中药醇提取物

广东药科大学硕士研究生学位论文2.5.2打孔法初筛水提液水提液有6种药物能透明抑菌圈，但其中有菌生长的有2炎可宁片、8葛根岑连片、9牛黄解毒片。（见图2-2和表2-3）

图3-1提取液对铜绿假单胞菌的MIC

并用灭菌PBS洗涤，再加入5％AgNO3溶液作用15m显色2min后用蒸馏水洗涤1min，最后再用5％NaS2O3PBS清洗，光学显微镜100×与400×下观察。结果最低抑菌浓度的测定菌株CV026的初筛中，发现冬凌草片醇提液与炎可宁片因此，为了进一....

本文编号：3927723