不同浓度黄芪补阳还五汤对TLR4和LOX-1的影响及抗动脉粥样硬化机制研究

发布时间：2024-03-06 04:12

　　目的:用血清药理学方法研究不同浓度黄芪补阳还五汤对TLR4及LOX-1的表达影响,探讨不同浓度黄芪补阳还五汤防治动脉粥样硬化的机制。方法:1.12只体重为2kg±0.5kg的实验用雄性普通级家兔随机分为空白组、中药高、中、低剂量组,每组3只,分别以生理盐水和高、中、低浓度黄芪的补阳还五汤灌胃,每日一次,连续7天。于末次灌胃给药1h后,心脏采血,离心后抽取上清液,并用0.22μm一次性滤器无菌过滤,置-80℃冰箱中保存备用。2.在无菌条件下,复苏第三代人脐静脉内皮细胞,在37℃、5%C02条件下培养。3.人脐静脉内皮细胞,随机分为6组,即正常组,模型组,西药对照组,含高、中、低浓度黄芪的补阳还五汤组,用LPS(1μg/ml)刺激人脐静脉内皮细胞,激活TLR4和LOX-1,并用不同浓度黄芪的补阳还五汤含药血清和阿托伐他汀进行干预,24h后收集细胞。用蛋白免疫印迹方法检测TLR4和LOX-1的蛋白表达。结果:经LPS刺激24h以后,模型组细胞TLR4及LOX-1蛋白表达明显升高(与空白组比较P<0.01);经药物干预后各治疗组细胞TLR4及LOX-1的蛋白明显下降,其中西药对照组效果最...

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【学位级别】：硕士

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摘要
Abstract
第一章 前言
第二章 材料和方法
    2.1 实验材料
        2.1.1 实验动物
        2.1.2 实验药物
        2.1.3 实验试剂
        2.1.4 主要设备和仪器
    2.2 实验方法
        2.2.1 实验分组
        2.2.2 含药血清的制备
        2.2.3 人脐静脉传代内皮细胞的复苏和培养
        2.2.4 细胞计数
        2.2.5 分组干预
        2.2.6 蛋白免疫印迹方法
            (1) 主要试剂
            (2) 人脐静脉内皮细胞的蛋白提取
            (3) 蛋白定量和变性
            (4) 分离胶和浓缩胶的制备
            (5) 具体的电泳操作方法与步骤为:
            (6) 转膜和操作
            (7) 孵育和显影
            (8) 量化分析
            (9) 统计学方法
第三章 结果
    3.1 含药血清制备
    3.2 人脐静脉传代内皮细胞
    3.3 蛋白免疫印迹法检测TLR4的表达的影响
    3.4 蛋白免疫印迹法检测Lox-1的表达的影响
第四章 讨论
    4.1 TLR4与动脉粥样硬化的关联
    4.2 内皮细胞与动脉粥样硬化的关联
    4.3 中药含药血清的研究
    4.4 阳性对照组的选择
    4.5 中医“气能行血”干预机理
    4.6 不同浓度黄芪的补阳还五汤对TLR4及LOX-1的影响
结论
参考文献
综述
    参考文献
致谢



本文编号：3920533