葡萄籽提取物对糖尿病视网膜保护作用及机制

发布时间：2024-01-08 19:42

　　糖尿病视网膜病变(Diabetic Retinopathy,DR)是最为多见的糖尿病并发症,也是成年人获得性致盲的一种主要原因。在疾病早期,视网膜Müller细胞在高血糖诱导的氧化应激刺激下发生活化,大量表达血管生长因子及促炎因子。通过膳食补充抗氧化剂是预防及缓解糖尿病视网膜病变的重要手段,葡萄籽提取物(Grape Seed Extract,GSE)中富含多酚类化合物,具有很强的抗氧化、抗炎作用,但其抑制糖尿病视网膜炎症反应的作用及机制尚未阐明。本文通过构建高糖诱导视网膜Müller细胞活化模型、糖尿病视网膜病变大鼠模型,研究葡萄籽提取物对高糖刺激视网膜Müller炎症反应的抑制作用,探讨葡萄籽提取物对糖尿病视网膜病变的保护作用及机制。主要研究内容及结果包括:1.葡萄籽提取物对高糖诱导原代培养大鼠视网膜Müller细胞的炎症反应具有显著的抑制作用。Real-time PCR和ELISA检测结果表明,10μg/mL GSE能够显著抑制高糖诱导Müller细胞表达、分泌血管内皮生长因子(VEGF);此外,GSE显著降低促炎因子IL-6和Müller细胞活化标志性分子GFAP在mRNA水平的...

【文章页数】：74 页

【学位级别】：硕士

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摘要
Abstract
第一章 绪论
    1.1 糖尿病视网膜病变
        1.1.1 糖尿病视网膜病变概述
        1.1.2 糖尿病视网膜病变与视网膜Müller细胞
    1.2 葡萄籽提取物
        1.2.1 葡萄籽提取物主要成分及其生物活性
        1.2.2 低聚原花青素及其生物活性
    1.3 课题的研究内容及研究意义
第二章 葡萄籽提取物对高糖诱导大鼠视网膜Müller细胞炎症反应抑制作用
    2.1 引言
    2.2 材料与仪器
        2.2.1 主要材料与试剂
        2.2.2 主要仪器
    2.3 实验方法
        2.3.1 细胞培养
        2.3.2 原代培养大鼠视网膜Müller细胞鉴定
        2.3.3 不同浓度葡萄糖处理大鼠视网膜Müller细胞模型
        2.3.4 Müller细胞活性实验
        2.3.5 ELISA检测VEGF表达
        2.3.6 Real-time PCR检测基因表达
        2.3.7 数据处理
    2.4 结果与分析
        2.4.1 原代培养大鼠视网膜Müller细胞免疫荧光鉴定
        2.4.2 培养基中糖浓度对Müller细胞表达VEGF的影响
        2.4.3 葡萄籽提取物对高糖刺激Müller细胞表达炎症因子的影响
    2.5 讨论
    2.6 本章小结
第三章 葡萄籽提取物对糖尿病大鼠视网膜组织损伤的保护作用及机制
    3.1 引言
    3.2 材料与仪器
        3.2.1 实验动物
        3.2.2 主要材料与试剂
        3.2.3 主要仪器
    3.3 研究方法
        3.3.1 糖尿病大鼠模型的建立与评估
        3.3.2 动物分组干预
        3.3.3 动物标本采集
        3.3.4 视网膜组织切片HE染色
        3.3.5 大鼠视网膜组织Real-time PCR检测
        3.3.6 视网膜组织切片免疫组化分析
        3.3.7 视网膜组织切片免疫荧光分析
        3.3.8 数据处理
    3.4 结果与分析
        3.4.1 糖尿病大鼠模型的构建及葡萄籽提取物对血糖、体重的影响
        3.4.2 葡萄籽提取物对糖尿病大鼠视网膜组织形态学的影响
        3.4.3 葡萄籽提取物对糖尿病大鼠视网膜组织内Müller细胞活化的影响
        3.4.4 葡萄籽提取物对糖尿病大鼠视网膜组织内炎症因子表达的影响
        3.4.5 葡萄籽提取物对糖尿病大鼠视网膜的保护机制探讨
    3.5 讨论
    3.6 本章小结
第四章 结论与展望
    4.1 主要结论
    4.2 研究展望
参考文献
附录1 葡萄籽提取物的成分检测
致谢
攻读硕士学位期间已发表、录用的论文



本文编号：3877551