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混合精斑不同免疫学检验方法的联用分析

发布时间:2024-04-01 03:11
  在法医鉴定里,精斑是性犯罪中的重要证据之一,其作用不可替代,一般可以作为案件定性的主要依据。显微镜镜检精子细胞、免疫学方法以及组织化学等方法常用于检验精斑,但每种检测方法都存在一定的优势及不足。目前,在法医鉴定中得以广泛应用的精斑分离方法是差异裂解法,然而在实际操作中,由于检材的多样性,存在精斑混合女性分泌物、精斑混合血斑、多人精斑、精子量过少等复杂情况,能否有效处理这些情况将直接影响到后期精斑检测的准确性,而差异裂解法只能解决部分问题,有时难以得到嫌疑人的单一DNA分型。因此,对混合精斑进行分离确证是近年来研究的重点和物证检验中的难点。研究表明,精斑试纸条法是检测前列腺特异性抗原(PSA)的灵敏度较高的简便方法,可以用于确证精斑的存在,达到快速筛选的效果;免疫磁珠法采用磁性分离技术,可以捕获精斑中的精子核酸,用于纯化、扩增和检测;激光捕获显微分离技术则可以捕获单一精子,以确保准确获得单一DNA分型。因此,针对传统检测方法所存在的不足,本文联用精斑试纸条法、免疫磁珠法及激光捕获显微分离技术此三种技术,配合低体积扩增,必要时将获得的所有分型进行汇总、叠加,最后进行分类,从而获得每个精子供...

【文章页数】:47 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

图1免疫磁珠法提取核酸的原理及步骤[20]

图1免疫磁珠法提取核酸的原理及步骤[20]

图1免疫磁珠法提取核酸的原理及步骤[20]在免疫磁珠法提取核酸的原理的基础上,本文使用的赛默飞公司的KingFisher核酸纯化仪实现了全自动化批量处理。其采用永久磁棒和一次性磁套,当磁套套在磁棒尖端放入溶液中时,磁棒通电时能产生磁场,溶液中带有磁性核心的的磁珠被吸引、收集....


图2激光压力弹射的过程

图2激光压力弹射的过程

13/45图2激光压力弹射的过程[46]1.3其他1.3.1短串联重复序列短串联重复序列(shorttandemrepeat,STR)是一种遗传标记,在当前的法医学检验工作中应用较广。短串联重复序列,核心序列包括2-6bp,为长度多态性序列,包含较大的信息量,遗传多态性....


图3-1自愿者C精斑经一般DNA提取的Y-STR分型图

图3-1自愿者C精斑经一般DNA提取的Y-STR分型图

空白区域作为阴性对照只在控制区出现一条紫红色线条,未见阳性反应,见表1。表1抗前列腺特异性抗原胶体金免疫试纸条法检测情况自愿者A自愿者B自愿者C混合精斑阴性对照检测结果++++-注:“+”为阳性,“-”为阴性3.1.2一般DNA提取和超....


图3-2自愿者B精斑经一般DNA提取的Y-STR分型图

图3-2自愿者B精斑经一般DNA提取的Y-STR分型图

图3-2自愿者B精斑经一般DNA提取的Y-STR分型图经磁珠法替代第二步消化步骤,用KingFisher核酸纯化仪按仪器操作规程完成自动提取纯化的4份DNA检材获得的精斑STR分型结果中,3份单一精斑检材均得到完整STR分型结果,RFU值在....



本文编号:3944907

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