AlCl 3 抑制大鼠骨形成及BMP/Smad信号转导通路的机制

发布时间：2023-05-28 10:44

　　为探讨AlCl₃抑制大鼠骨形成及BMP/Smads信号转导通路的作用机制本实验以Wistar大鼠为研究对象,将200只4周龄大鼠随机分成实验组和对照组:实验组大鼠通过饮水染铝(AlCl₃·6H₂O),饮用水中Al3+终浓度为64mg/kg?体重;对照组大鼠饮用蒸馏水。各组大鼠采用大鼠标准饲料常规饲养,自由采食饮水,所有用具均不使用含铝制品。实验设染铝后30d、60d、90d、120d四个检测点,每次以乙醚麻醉、眼球放血的方式处死实验组和对照组大鼠各25只,取血清及股骨组织。采用火焰原子吸收分光光度法测定血清和骨组织中铝含量;采用双能X线骨密度仪检测骨密度(BMD);q RT-PCR技术检测BMP-2、BMPRI/II、Smad4、Runx2、Osterix、ALP、Col I、BGP mRNA的表达;western blot方法检测BMP-2、p-BMPRIA、p-Smad1/5/8、Runx2、Osterix蛋白的表达;免疫共沉淀方法检测p-Smad1/5/8/4复合物的入核情况,结果表明:(1)染铝组大鼠血清和骨中铝...

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【学位级别】：硕士

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摘要
英文摘要
1 前言
    1.1 铝对骨的毒性作用
    1.2 铝与骨形成
        1.2.1 铝与B-ALP
        1.2.2 铝与Col I
        1.2.3 铝与BGP
    1.3 铝对骨中BMP/Smad信号转导通路的作用
        1.3.1 BMP-2 与骨形成
        1.3.2 BMP-2 与Smad家族
        1.3.3 BMP/Smad信号转导通路与骨形成
    1.4 细胞核转录因子与骨形成
        1.4.1 Runx-2 与骨形成
        1.4.2 Osterix与骨形成
    1.5 研究目的和意义
2 材料与方法
    2.1 实验仪器与试剂
        2.1.1 实验仪器
        2.1.2 试剂
    2.2 实验动物及样品采集
        2.2.1 实验动物
        2.2.2 样品采集及处理
    2.3 检测项目与方法
        2.3.1 血清和股骨中铝含量的检测
        2.3.2 骨密度(BMD)的检测
        2.3.3 骨中ALP、Col I、BGP、BMP-2、BMPR-IA、BMPR-II、Smad4、Runx2、OSX mRNA表达的检测
        2.3.4 骨中BMP-2、p-BMPRIA、p-Smad1/5/8 蛋白表达的检测
        2.3.5 骨中p-Smad1/5/8/4 复合物入核情况的检测
        2.3.6 骨中核转录因子Runx2和OSX蛋白表达量的检测
    2.4 实验数据的分析及统计
3 结果与分析
    3.1 血清和骨中铝的含量
    3.2 AlCl₃对骨密度的影响
    3.3 AlCl₃对骨组织B-ALP、BGP、Col I mRNA表达的影响
    3.4 AlCl₃对骨组织中BMP-2、BMPR-IA、BMPR-II、Smad4mRNA表达的影响
    3.5 AlCl₃对骨组织BMP-2、p-BMPRIA、p-Smad1/5/8 蛋白表达的影响
    3.6 AlCl₃对骨中p-Smad1/5/8/4 复合物入核情况的影响
    3.7 AlCl₃对骨中Runx2、Osterix mRNA和蛋白表达的影响
        3.7.1 AlCl₃对骨中Runx2、Osterix mRNA表达的影响
        3.7.2 AlCl₃对骨中Runx2、Osterix蛋白表达影响
4 讨论
    4.1 AlCl₃对骨形成的影响
    4.2 AlCl₃对BMP/Smad信号转导通路的影响
    4.3 AlCl₃对细胞核转录因子的影响
5 结论
致谢
参考文献
攻读硕士学位期间发表的学术论文



本文编号：3824439