莱菔素制剂稳定性和抗癌活性研究

发布时间：2024-05-18 20:19

　　莱菔素是具有抗癌、抗菌、抗氧化等活性的天然产物,但由于其易降解的特性阻碍其成药。传统工艺中利用萝卜硫苷粗酶液与黑芥子酶反应生成的莱菔素纯度低、产率也不高,本研究利用结晶的方法纯化了稳定的底物萝卜硫苷,且利用树脂固定了黑芥子酶,从而得到经济、纯度高、收率高的莱菔素。另外,为了提高莱菔素的稳定性,本实验研究了莱菔素的两种制剂在西林瓶中的储存稳定性。第一种是无水辅料和莱菔素糊精粉末的混合制剂,通过实验发现其大大提高了而莱菔素的稳定性,且体外活性实验也证实了其不会降低莱菔素的抗癌药效;第二种则是羟丙基-β-环糊精/莱菔素的包合物制剂,本研究优化了包合条件,利用傅里叶红外光谱、示差量热扫描法和扫描电镜三种表征方法证实了包合物的形成,体外稳定性实验也表现了包合物可以有效提高莱菔素稳定性,体外释放实验则模拟了包合物在体内的药物释放,证明包合物有缓释效果。细胞实验也证明了包合物的抗癌药效具有广谱性和浓度依赖性,接下来利用急性毒性实验选取了腹腔注射的给药方式进行体内活性实验,发现包合物剂型在提高莱菔素稳定性的同时,具有与游离药相比更小的毒性和更好的抗癌活性。

【文章页数】：90 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图２－１环氧树脂固定酶的原理??Ｆｉｇ．?２－１?Ｓｅｌｆ－ｂｏｎｄｉｎｇ?ｍｅｃｈａｎｉｓｍ?ｏｆ?ｅｎｚｙｍｅ?ａｎｄ?ｅｐｏｘｙ?ｒｅｓｉｎ??

物应较易于分离，因此价格低廉且容易保存的固定化载体成为首选。在对一些载体进??行筛选后，本实验选择了西安蓝晓公司的ＬＸ－１０００ＥＰ树脂，该树脂带有特殊官能团??环氧丙基，这种官能团可以与酶共价结合，结合机理如图２－１所示，ＬＸ－１０００ＥＰ树脂??的环氧基与酶分子的氨基直接通过....

图２－２牛血清蛋白标准曲线??

对底物的转换率是否发生改变，需要先确定固定在树脂上的酶量。固定后的滤液通过??考马斯亮蓝法所得５９５?ｎｍ下的吸光度值，经过牛血清蛋白标准曲线用差减法计算可??得到酶的固载率，标准曲线如图２－２所示。??Ｑ．Ｓｎ??■?，?ｙ＾０．（Ｍ？９ｘ＊０．＜ＪＪ９２??Ｒ－－０?＊＞？？....

图２－３载体量优化??－

对底物的转换率是否发生改变，需要先确定固定在树脂上的酶量。固定后的滤液通过??考马斯亮蓝法所得５９５?ｎｍ下的吸光度值，经过牛血清蛋白标准曲线用差减法计算可??得到酶的固载率，标准曲线如图２－２所示。??Ｑ．Ｓｎ??■?，?ｙ＾０．（Ｍ？９ｘ＊０．＜ＪＪ９２??Ｒ－－０?＊＞？？....

图２－４酶量的优化??

??固定化过程的载酶量会受到载体量大小的影响，如图２－３所示，载体量为０．２?ｇ??和０．４?ｇ的固载率较低，但固载率会随着载体量的增加而上升，其余三个载体量体系??的固载率在７０％－８０％之间上下波动，组件差异较小，可能是不同批次之间的偶然误差??引起的，可以认为０．６?ｇ载体....

本文编号：3977304