丙戊酸对体外培养人红系细胞γ-珠蛋白基因表达及细胞增殖的影响

发布时间：2024-01-29 18:31

　　目的通过人外周血红系细胞培养，研究丙戊酸（VPA）对γ-珠蛋白基因表达情况，以及对红系细胞生长、红系细胞集落形成的影响,探讨VPA对红系细胞的作用情况。 方法分别以不同浓度VPA（0mmol/L、0.5mmol/L、1.0mmol/L、2.0mmol/L、3.0mmol/L）作用于培养的红系细胞，于24h、48h、72h后检测各项指标。收集培养体系细胞常规瑞士染色，采用光学显微镜观察红系细胞形态学特征，用Cell Counting Kit-8(CCK-8)试剂检测细胞存活率，使用甲基纤维素培养基培养红系细胞集落，观察不同浓度VPA对集落形成能力的影响，通过实时荧光定量RT-PCR法检测红系细胞γ-珠蛋白基因表达的改变。 结果VPA对红系细胞的生长抑制作用有浓度和时间依赖性。细胞存活率随VPA浓度及作用时间呈反比，浓度因素及时间因素有交互作用，细胞存活率由高到低排列，VPA浓度依次为0.5mmol／L、1.0mmol／L、2.0mmol／L、3.0mmol／L，时间依次为24h、48h、72h。VPA对红系细胞CFU-E形成能力的影响有浓度依赖性。形成的集落数量随浓度的增加而降低，由高到...

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图2红系细胞形态学特征：A：第四天红系细胞；B：第八天红系细胞Fig.2morphologicalcharacteroferythroidcellA800×B800×

图7实时荧光定量RT-PCR扩增曲线，A为为GAPDH内参基因，B为Y-珠蛋白基因

图8实时荧光定量RT-PCR溶解曲线C为GAPDH内参基因，D为γ-珠蛋白基因

图3红系集落特征：A为第七天形成集落，B为第八天形成集落

本文编号：3888622