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Notch信号下游靶点Hey1在BMP9诱导下C3H10T1/2细胞的成骨分化及增殖中的作用

发布时间:2024-03-31 11:54
  目的通过体外培养小鼠成纤维细胞C3H10T1/2模拟干细胞,采用慢病毒干预使C3H10T1/2细胞中Hey1基因分别过表达和抑制表达,然后使用含骨形态发生蛋白9(BMP9)的条件培养基模拟诱导成骨分化,探讨Notch信号通路重要靶点Hey1表达水平改变对BMP-9诱导C3H10T1/2细胞成骨分化与增殖的影响。方法构建过表达Hey1慢病毒LV-Hey1、抑制Hey1表达慢病毒LV-sh Hey1,分别感染C3H10T1/2细胞,以LV-Blank(空质粒)感染C3H10T1/2细胞作为对照组;使用荧光显微镜对慢病毒感染的效果、实时荧光定量PCR和Western blot对Hey1表达水平进行验证,筛选出不同Hey1表达水平的稳定C3H10T1/2细胞系。对已改变Hey1表达水平的C3H10T1/2细胞用含BMP-9的条件培养基诱导,分别为以下三组BMP-9+C3H10T1/2组、BMP-9+C3H10T1/2-Hey1组、BMP-9+C3H10T1/2-sh Hey1组,然后以正常培养基培养的细胞作为对照(C3H10T1/2组、C3H10T1/2-Blank组)。培养后48 h后,实时...

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